hellobio：Streptavidin AF488 货号：HB13531
| 生物学描述 | 链霉亲和素AF488是与荧光染料AF488缀合的生物素结合蛋白，可用于检测生物素标记的分子，如核酸、抗体和其他蛋白质。生物素化的抗体通过链霉亲和素AF488以高的亲和力结合，使得能够在IHC、ICC、流式细胞术和蛋白质印迹中进行免疫荧光检测。 关键特征: - 与AF488共轭(Ex:498纳米，Em:525纳米)
- 作为更稳定的冻干剂提供
- 用于重复成像的明亮且光稳定的信号
- 适用于IHC(IF)、ICC、蛋白质印迹和流式细胞仪
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| 描述 | AF488缀合链霉亲和素，用于生物素偶联蛋白和抗体的检测和信号放大。 |
图一。大鼠海马内表达小清蛋白和钙视网膜素的中间神经元。
大鼠海马染色HB6457
检测小清蛋白和HB6494
来检测钙视网膜素。使用抗小鼠生物素抗体(HB11345
随后用链霉亲和素AF488 (HB13531)孵育。方法:将大鼠脑解剖并在4% PFA中固定过夜，然后在30%蔗糖(在PBS中)中孵育直到下沉(大约。48小时)。在切片在1% NaBH4中孵育30分钟之前，使用冷冻切片机切割40 μm水平切片。切片在0.05M甘氨酸、2% BSA和3%驴血清中封闭，然后在小清蛋白中孵育过夜HB6457(1:1000稀释)和CalretininHB6494(1∶4000稀释度)在4℃下。随后用1∶300稀释度的二抗山羊抗小鼠生物素抗体孵育2小时HB11345，山羊抗兔Janelia Fluor 549)。在PBST洗涤三次后，切片在室温下用1.0 L/mL的链霉亲和素AF488 (HB13531)孵育2小时。DAPIHB0747以1克/毫升的浓度使用以显现细胞核。欲了解更多详情，请参阅我们的IHC协议。使用徕卡DMI6000B倒置落射荧光显微镜捕获图像。使用z-stack中的20x物镜以tilescan的形式拍摄图像，曝光时间:A4: 57.803毫秒，GFP: 524.211毫秒，Y3: 524.211毫秒
图二。海马中表达小清蛋白的中间神经元和表达GFAP的星形胶质细胞。
大鼠海马染色HB6457检测小清蛋白和HB6406去探测GFAP。使用抗小鼠生物素抗体(HB11345随后用链霉亲和素AF488 (HB13531)孵育。方法:将大鼠脑解剖并在4% PFA中固定过夜，然后在30%蔗糖(在PBS中)中孵育直到下沉(大约。48小时)。在切片在1% NaBH4中孵育30分钟之前，使用冷冻切片机切割40 μm水平切片。切片在0.05M甘氨酸、2% BSA和3%驴血清中封闭，然后在小清蛋白中孵育过夜HB6457(1:1000稀释)和GFAPHB6406随后用1∶300稀释度的二抗(山羊抗小鼠生物素化抗体HB11345，山羊抗鸡647，Invitrogen)孵育2小时。在PBST洗涤三次后，切片用链霉亲和素AF488孵育HB13531在室温下以1.0升/毫升的浓度持续2小时。DAPIHB0747以1克/毫升的浓度使用以显现细胞核。欲了解更多详情，请参阅我们的IHC协议。使用徕卡DMI6000B倒置落射荧光显微镜捕获图像。使用z堆叠中的20x物镜拍摄图像，曝光时间:A4: 57.803毫秒，GFP: 151.803毫秒，Y5: 599.044毫秒
图3。大鼠海马中链霉亲和素AF488的浓度反应。
链霉亲和素AF488用于检测大鼠海马中表达小清蛋白的中间神经元。链霉亲和素AF488 (HB13531)在低至1 g/ml的浓度下产生强染色。方法:将大鼠脑解剖并在4% PFA中固定过夜，然后在30%蔗糖(在PBS中)中孵育直到下沉(大约。48小时)。在切片在1% NaBH4中孵育30分钟之前，使用冷冻切片机切割40 μm水平切片。切片在0.05M甘氨酸、2% BSA和3%驴血清中封闭，然后在小清蛋白中孵育过夜HB6457(1∶1000稀释度)在4℃下。随后用1∶300稀释度的第二抗体(山羊抗小鼠生物素抗体)孵育2小时HB11345).在PBST洗涤三次后，切片与1.0 g/mL、5.0 g/mL和10.0 gL/mL的链霉亲和素AF488 (HB13531)在室温下孵育2小时。DAPIHB0747以1克/毫升的浓度使用以显现细胞核。有关更多详情，请参阅我们的href = "/免疫组织化学-ihc-protocol"> IHC(IF)方案。使用徕卡DMI6000B倒置落射荧光显微镜捕获图像。使用z型堆栈中的20x物镜拍摄图像，曝光时间为:
1.0克/毫升:A4: 57.803毫秒，GFP: 151.803毫秒
5.0克/毫升:A4: 71.225毫秒，GFP: 381.278毫秒
10.0克/毫升:A4: 71.225毫秒，GFP: 401.056毫秒
图4:大鼠海马中表达小白蛋白的中间神经元
大鼠海马染色HB6457检测表达小清蛋白的中间神经元。使用抗小鼠生物素抗体(HB11345随后用链霉亲和素AF488 (HB13531)孵育。方法:将大鼠脑解剖并在4% PFA中固定过夜，然后在30%蔗糖(在PBS中)中孵育直到下沉(大约。48小时)。在切片在1% NaBH4中孵育30分钟之前，使用冷冻切片机切割40 μm水平切片。切片在0.05M甘氨酸、2% BSA和3%驴血清中封闭，然后在小清蛋白中孵育过夜HB6457(1∶1，000稀释度)在4℃下。随后用1∶300稀释度的山羊抗小鼠生物素抗体与第二抗体孵育2小时HB11345).在PBST洗涤三次后，切片在室温下用1.0 L/mL的链霉亲和素AF488 (HB13531)孵育2小时。DAPIHB0747以1克/毫升的浓度使用以显现细胞核。欲了解更多详情，请参阅我们的IHC协议。使用徕卡DMI6000B倒置落射荧光显微镜捕获图像。使用z-stack中的20x物镜以tilescan的形式拍摄图像，曝光时间:A4: 57.803毫秒，GFP: 524.211毫秒，Y3: 524.211毫秒
| 光谱相似的染料 | Alexa Fluor 488，Atto 488，DyLight 488，FITC |
生物数据
| 应用笔记 | #方案1:在IHC检测生物素标记的抗体 1.在NaBH中孵育自由漂浮的大鼠脑切片(40 m)4)15分钟，然后在封闭缓冲液(0.05M甘氨酸、2% BSA和3%驴血清)中2小时。 2.将切片与封闭缓冲液中的一抗一起在4℃孵育过夜，如我们的IHC议定书。 3.在PBST清洗切片三次，每次5分钟。 4.用2 g/mL山羊抗小鼠生物素抗体孵育切片HB11345或山羊抗兔抗体HB11036室温下在封闭缓冲液中稀释2小时 5.在PBST清洗切片三次，每次5分钟。 6.在封闭缓冲液中用1 g/mL链霉亲和素AF488孵育切片2小时。 7.在PBST清洗切片三次，每次5分钟。 8.用10克/毫升DAPI孵育切片10分钟。 9.在dH中清洗切片2o，用固定介质固定在载玻片上，并用盖玻片覆盖。 10.使用488nm激光或GFP滤光片激发链霉亲和素AF488，在显微镜上对切片成像。 |
溶解性和处理
| 重构建议 | 我们建议用1毫升以下物质复原:- dH2O并储存在4°C
- dH2O与甘油的比例为50∶50，并储存在-20℃下
- 然后将dH2O等分并储存在-80℃下
打开时要小心，因为沉淀物轻，如果受到干扰很容易丢失。重构时，在以< 10，000g的速度短暂旋转链霉亲和素之前，确保通过上下移液溶解链霉亲和素，以确保所有材料都被回收并位于试管底部。 |
| 存储器缓冲区 | 复溶时包含含0.05%die**钠和1%重组牛血清白蛋白的PBS。 |
| 重要的 | 本产品仅供研究使用，不用于治疗或诊断用途。不适用于人类或兽医 |
上海牧荣生物科技有限公司
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