1. 该试剂已经过预稀释，可按每次测试的推荐体积使用。我们通常在 100 μl 实验样品中使用 1 × 10^6 个细胞（测试）。

2. 同型对照应使用与目标抗体浓度相同的浓度。

3. 注意：

4. 在酸性条件下产生剧毒的肼氮酸。丢弃前，请在流水中稀释叠氮化物化合物，以避免潜在爆炸性沉积物在管道中积聚。

5. 有关荧光染料光谱和合适的仪器设置

6. PE-Cy5 是由 R-藻红蛋白 （PE） 组成的串联荧光染料，其被氩离子激光器的 488 nm 光激发，并作为能量供体与花青染料 Cy5 偶联，后者充当能量受体并在 670 nm 处发出荧光。BD Biosciences Pharmingen最大限度地提高了PE-Cy5中的荧光染料能量转移，从而最大限度地提高了其荧光发射强度，最大限度地减少了PE的残余发射，并最大限度地减少了批次间的变化。

7. PE-Cy5 经过优化，可与发射 488 nm 光的单氩离子激光器配合使用。由于 PE-Cy5 串联荧光染料的吸收光谱较宽，因此在使用可能直接激发 PE 和 Cy5™ 的双激光细胞仪时必须格外小心。

8. Cy 是 GE Healthcare 的商标。

9. 在产品开发中检测到的物种交叉反应性可能尚未在每种规格和/或应用中得到证实。

10. 请遵守以下预防措施：可见光的吸收会显著改变任何串联荧光染料偶联物中发生的能量传递;因此，我们建议采取特殊的预防措施（例如用铝箔包裹样品瓶、试管或架子），以防止偶联试剂（包括用这些试剂染色的细胞）暴露在室内照明下。

11. 据报道，PE-Cy5 串联荧光染料可通过 Fc 受体结合某些类别的人巨噬细胞和粒细胞，并且 PE 可通过 Fc 受体与小鼠 B 淋巴细胞结合。小鼠白细胞与小鼠 BD Fc Block™ 纯化的抗小鼠 CD16/CD32 mAb 2.4G2 预孵育可减少 PE-Cy5 偶联试剂与小鼠 B 细胞的非特异性结合。然而，PE-Cy5 偶联试剂不应用于 SJL、NOD 和 MRL 小鼠的脾细胞染色，因为据报道，无论是否使用小鼠 BD Fc 阻滞™，B 淋巴细胞和/或其他白细胞都会进行非特异性染色（CD72c 复合物与这些菌株中的 PE-Cy5 结合有关）。与 PE、PerCP、PerCP-Cy5.5、APC 和 APC-Cy7 串联荧光染料偶联的试剂可用于这些小鼠品系的白细胞。

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