神经胶质瘤细胞；H4操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除细胞消化液后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
在组织的消化过程中，首先需将选取的组织样本剪切成细小的碎片，以便于消化酶更好地渗透和作用。随后，将这些碎片转移至含有适量生物 Trypsin-EDTA solution 或其他适宜组织消化酶的容器中，根据组织的类型和硬度，消化时间可从数分钟至数小时不等，期间需不时观察并轻柔振荡，以促进消化均匀进行。
当观察到组织碎片已明显分散成单个细胞或较小的细胞团块时，表明消化过程基本完成。此时，应立即终止消化，可通过加入含有血清的细胞培养液来中和消化酶。使用吸管或移液器轻轻吹打消化液，以促进细胞进一步分散。
之后，将含有消化后细胞的悬液通过细胞筛网过滤，以去除未消化的组织碎片和杂质。接着，将过滤后的细胞悬液进行离心处理，转速同样控制在1000～2000g，离心时间1～2分钟，以沉淀细胞。离心后，小心吸除上清液，再加入含血清的培养液，轻轻吹打重悬细胞，使其达到适宜的浓度和活性状态，为后续的实验操作如细胞培养、分析或分离特定类型细胞等做好准备。
