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IL-4/IL-13响应型STAT6荧光素酶报告基因
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武汉艾美捷科技有限公司（AmyJet Scientific Inc），简称艾美捷科技（AmyJet Scientific）。2010年底成立于九省通衢的湖北省武汉市，历经五年多的发展，已成为国内的集进口试剂、实验室耗材销售、技术服务与合约开发为一体的专业化高科技生物企业。艾美捷科技总部设在武汉市洪山区光谷大道35号光谷总部二期时代1号楼13层，业务覆盖全国。
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详细信息
IL-4/IL-13响应型STAT6荧光素酶报告基因HEK293细胞系是一种稳定整合了受STAT6响应元件控制的萤火虫荧光素酶报告基因和人类STAT6（信号转导及转录激活因子6）的HEK293细胞系，形成了一个w全功能的STAT6信号通路。该细胞系已通过人类IL-4（白细胞介素-4）和IL-13（白细胞介素-13）的激活实验以及使用抗IL-4R和抗IL-13R拮抗剂进行了验证。
背景
转录因子STAT6（信号转导及转录激活因子6）在免疫细胞中扮演着至关重要的角色。IL-4激活的STAT6信号对于Th2分化和免疫球蛋白类别转换是必需的，它还介导巨噬细胞中炎症增强子的直接抑制。STAT6参与过敏性炎症疾病的多个方面，如气道高反应性、嗜酸性粒细胞浸润和肥大细胞反应。STAT6主要被IL-4和相关的IL-13激活，它们具有重叠的生物学特性。当IL-4和IL-13结合时，由IL-4Ralpha和IL-13Ralpha1组成的受体复合物激活与受体相关的Janus激酶（JAK1和Tyk2），从而导致STAT6的激活。激活的STAT6形成同源二聚体，转移到细胞核中，在那里它们结合响应基因的启动子，诱导基因转录。尽管这两种细胞因子都激活STAT6信号，但已证明IL-4在启动这一信号通路方面比IL-13更有效。STAT6通路的功能障碍会导致过敏反应（哮喘、特应性皮炎、食物过敏）和癌症（霍奇金病、中枢神经系统和滤泡性淋巴瘤）。STAT6可以作为诊断和预后工具。抑制剂已被证明可以减少动物模型中的急性炎症，未来的发展可能会导致新的针对STAT6相关病理的治疗工具。
作为BPS Bioscience在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience热销产品IL-4/IL-13 响应型 STAT6 荧光素酶报告基因 HEK293 细胞系。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。
| 产品名称 | 货号 | 详情 |
IL-4/IL-13 响应型 STAT6 荧光素酶报告基因 HEK293 细胞系 | BPS-78941 | 查看 |
应用
? 筛选和表征STAT6信号通路的激活剂或抑制剂。
? 筛选抗IL-4、抗IL-4R、抗IL-13或抗IL-13R抗体。
细胞解冻
1. 在37°C水浴中摇晃装有冷冻细胞的小瓶大约60秒。细胞解冻后（可能比60秒稍快或稍慢），迅速将小瓶的全部内容转移到含有10 ml预热的解冻培养基1的试管中。
注意：在37°C水浴中放置细胞过久将导致活性迅速丧失。
2. 立即以300 x g的速度离心细胞5分钟，去除培养基并将细胞在5 ml预热的解冻培养基1中重悬。
3. 将重悬的细胞转移到T25或T75培养瓶中，并在37°C、5% CO2培养箱中培养。
4. 培养24小时后，检查细胞附着和活性。更换培养基为新鲜的解冻培养基1，并继续在37°C、5% CO2培养箱中培养，直到细胞准备好传代。
5. 细胞应在w全融合前传代。在s次传代及后续传代中，使用生长培养基1M。
细胞传代
1. 抽去培养基，用无Ca2+/Mg2+的磷酸盐缓冲液（PBS）冲洗细胞，并用0.05% y酶/EDTA从培养容器中分离细胞。
2. 一旦细胞分离，加入生长培养基1M并转移到试管中。
3. 以300 x g的速度离心细胞5分钟，去除培养基并将细胞在生长培养基1M中重悬。
4. 按照推荐的亚培养比例1:5至1:10，每周一次或两次将细胞种入新的培养容器中。
注意：解冻后和细胞密度低时，细胞可能生长速度较慢。在这些情况下，建议以1/4的比例分离细胞。经过几次传代后，细胞生长速度加快，可以使用更高的比例分离细胞。
细胞冷冻
1. 抽去培养基，用无Ca2+/Mg2+的PBS冲洗细胞，并用0.05% y酶/EDTA从培养容器中分离细胞。
2. 一旦细胞分离，加入生长培养基1M并计数细胞。
3. 以300 x g的速度离心细胞5分钟，去除培养基并将细胞在4°C冷冻培养基（BPS Bioscience #79796）中重悬，细胞浓度约为2 x 10^6个细胞/ml。
4. 将1 ml的细胞悬浮液分装到每个冷冻小瓶中。将小瓶放入保温容器中缓慢冷却，并在-80°C下保存过夜。
5. 次日将小瓶转移到液氮中长期保存。
注意：建议在早期传代时扩增细胞并至少冷冻10个小瓶以备将来使用。
图1：IL-4/IL-13响应型STAT6荧光素酶报告基因HEK293细胞系对人类IL-4和IL-13的反应。
IL-4/IL-13响应型STAT6荧光素酶报告基因HEK293细胞与不同浓度的人类IL-4（左图）和IL-13（右图）共培养6小时。使用ONE-Step?荧光素酶检测系统测量荧光素酶活性。结果以STAT6荧光素酶报告基因表达的诱导倍数显示，与无激动剂的细胞活性相对比。
文献参考：
Kasaian MT., et al., 2013. Am J Respir Cell Mol Biol. 49(1):37-46.
Czimmerer Z., et al., 2018. Immunity 48(1):75-90.e6.
BPS Bioscience是一家通过ISO 9001:2015认证的生命科学领域的供应商，公司一直致力于开发药物研发领域的重组蛋白酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选试剂盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年创立，从创立至今一直致力于提供药物研发领域的创新解决方案，以推动新的药物发现。公司主要关注的领域包括免疫疗法、表观遗传学、CRISPR、细胞信号转导等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。
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IL-4/IL-13响应型STAT6荧光素酶报告基因 IL-4/IL-13响应型STAT6荧光素酶报告基因
