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74904-- RNeasy Plant Mini Kit （50）
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- 74904--
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详细信息
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原理
RNeasy Plant Mini Kit 适用于从各种植物和真菌样本中分离包括病毒RNA在内的总RNA（见图"Detection of Viruses from a Variety of Plant Species by RT-PCR" 和表"Selected samples processed with RNeasy Plant Mini Kit"）。
| 规格： | 带1.5ml和2ml收集管的Mini分离柱 |
| 样本类型： | 植物和真菌的细胞或组织 |
| 样本量： | 10-100 mg 组织，100 - 1 x 107 细胞* |
| 制备时间： | 30 分钟 |
| 结合能力： | zui多100 µg RNA |
| 产量（100 mg 组织）†： | |
| 拟南芥 | 35 µg |
| 玉米叶 | 25 µg |
| 番茄叶 | 65 µg |
| 烟草叶 | 60 µg |
| 洗脱体积： | 30-100 µl |
*请致电QIAGEN咨询实验放大的方法。 †：由于发育阶段、生长条件等不同，获得产量将有所不同。由于RNeasy流程富集浓缩>200nt的RNA，因此RNA产物不包括5s rRNA、tRNAs或其他低分子量RNAs。
RNeasy技术将高效的异硫氰酸胍裂解技术与快速高纯度的硅胶膜纯化技术相结合，使总RNA分离变得简单化。该技术无需通过氯化铯（CsCl）梯度离心或氯化锂/乙醇沉淀。RNeasy样本制备技术已被*注册，纯化得到的核酸可用于任何分子检测或其他下游应用中，而无侵犯的风险。
RNeasy Plant Mini Kit提供QIAshredder分离柱（QIAshredder columns），用于匀质化和通过离心法过滤高粘度的植物或真菌裂解物，同时采用RNeasy mini离心柱对RNA进行纯化。各种污染物，如：多聚糖等被洗掉，经洗脱的RNA可直接用于各种下游应用（见图"Tissue Specificity of Histone H4 Expression"）。 RNeasy试剂盒提供高品质RNA，几乎无DNA残留。对微量DNA非常敏感的RNA应用，残留的DNA可在RNeasy流程中使用RNase-Free DNase Set方便地通过DNA酶柱上消化去除。
操作流程
细菌样品裂解后，在裂解液中加入乙醇来提供合适的结合条件，接着裂解液被上样到RNeasy硅胶膜上。RNA与硅胶膜结合，其他各种污染物通过洗涤被有效去除。浓缩的纯RNA被洗脱到无RNA酶的水中。
应用
经RNeasy技术纯化得到的RNA，A260/A280比值可达1.9-2.1*，非常适合于各种下游应用，包括：
- Northern杂交、点杂交和狭缝杂交
- RT-PCR（见QIAGEN RT-PCR Systems Overview）
- Real-time RT-PCR（见Quantitect SYBR Green PCR and RT-PCR System）
- 芯片分析（Array analysis）
*测于10mMTris-Cl，pH7.5
Selected samples processed with RNeasy Plant Mini Kit| 植物 | |
| Anemone sp. Arabidopsis thaliana1 Begonia sp. Beta vulgaris （甜菜）2 Chlamydomonas reinhardii （单细胞藻） 菊花 Clarkia spp.3 Daucus carota （胡萝卜）4 Diascia sp. Dendranthema sp. Euglena gracilis （单细胞藻） Funaria hygrometrica （苔藓） Hordeum vulgare （大麦） Lycopersicon esculentum （番茄）5 Malus sp. （苹果）6 Nicotiana tabacum （烟草） 丝状真菌类 Acremonium crysogenum9Fusarium avenaceum9 | Oryza sativa （水稻） Pelargonium sp. （天竺葵） Petroselinum crispum （欧芹）7 Pisum sativum （豌豆） Prunus sp. （樱桃）6 Ranunculus sp. Ribes nigrum （黑加仑） Riccia fluitans （地钱） Sinapis arvensis （芥菜） Solanum tuberosum （土豆）8 Spinacia oleracea （菠菜） Surfinia sp. Triticum aestivum （小麦） Vitis sp. （葡萄树）6 Zea mays （玉米） |
Young leaves or needles, except as indicated: 1 Flowers, buds, siliques, roots; 2 roots; 3 petals, stamen, stigma, sepals, style; 4 cultured cells; 5 mature flower, expanded leaves, shoot tip, stem, green fruit; 6 budwood; 7 seedlings; 8 dormant tuber; 9 mycelium
引用文献
1. MacKenzie, D.J., McLean, M.A., Mukerji, S., and Green, M. （1997） Improved RNA extraction from woody plants for the detection of viral pathogens by reverse transcription-polymerase chain reaction. Plant Disease 81, 222.
2. Brandstädter, J., Roßbach, C., and Theres, K. （1994） The pattern of histone H4 expression in the tomato shoot apex changes during development. Planta 192, 69.
Images
Detection of viruses from a variety of plant species by RT-PCR.
Tissue specificity of histone H4 expression.
