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5-羟色胺（serotonin）检测试剂盒
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详细信息
5-羟色胺（serotonin）检测试剂盒
【产品名称】
通用名称：5-羟色胺检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名称：Serotonin ELISA
【产品规格】
96T
【预期用途】
5-羟色胺（serotonin）检测试剂盒可用于人血清、血浆、血小板和尿液中五羟色胺的体外定量检测。进一步的研究表明：此试剂盒还可用于组织匀浆和细胞培养上清液的研究
【前言简介】
五羟色胺是色氨酸代谢的中间产物，它主要存在于肠嗜铬细胞、血清素激活的神经元和血小板中，它已被确定为是中枢神经系统的一种神经递质。循环血液中的五羟色胺几乎都集中于血小板内。循环五羟色胺浓度的变化可反映出人体的一些病理变化，这些病理变化包括：慢性肌紧张性头痛、精神分裂症、高血压、舞蹈症、杜氏肌萎症和早期急性阑尾炎。血清五羟色胺的检测对类癌综合征的检测具有重要临床意义。人们预计：在不久的将来，人们对血小板内五羟色胺的研究兴趣（包括五羟胺的吸收及释放动力学研究）应该会不断增长。
【检测原理】
样品准备（将五羟色胺转变为N-乙酰五羟色胺）是样品稀释的一部分，将每一份样品分别与酰化试剂一起温育就可以得到酰化的五羟色胺。此实验采用的是竞争性ELISA的原理，生物素标记的和非生物素标记的抗原竞争性结合到一定数量的抗体结合位点上。最后，结合到抗体上的生物素标记抗原的量与样品中被分析物的浓度成反比。当反应系统达到平衡后，洗板除去未结合的生物素标记抗原，用抗生物素碱性磷酸酶做标记、对硝基苯磷酸做底物来检测结合到抗体上的生物素标记抗原的量。用已知标准品做一条标准曲线，将未知样品的酶活性在标准曲线上进行定标就可以得到未知样品中五羟色胺的浓度。
【储存条件】
试剂盒和运输环境和储存环境温度为2-8℃，避免热源或太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂的准备将在相关章节中阐述。打开了的的试剂盒在有效期内稳定，前提是要将试剂盒用袋子密封并储存于2-8℃下。
检测步骤
简短操作步骤（仅供样品A使用，不能应用于血浆）
1 | 将标准品、酰化的质控品和酰化的样品各50µl加入到相应的微孔中。 |
2 | 在每一微孔中加入50µl五羟色胺生物素。 |
3 | 在每一微孔中加入50µl五羟色胺抗血清。 |
4 | 盖板，室温（18-25℃）下振荡（500rpm）温育90min。 |
5 | 移去封板纸，弃取孔内反应液，每孔用250µl稀释好的洗涤液洗板3次,吸水纸上拍干以除去残余液体。 |
6 | 在每一微孔中加入150µl临时准备好的酶联物。 |
7 | 盖板，室温（18-25℃）下振荡（500rpm）温育60min。 |
8 | 移去封板纸，弃取孔内反应液，每孔用250µl稀释好的洗涤液洗板3次,吸水纸上拍干以除去残余液体。 |
9 | 如果有条件的话，可以用8道移液器加底物液和终止液。加底物液和终止液时，每孔间的时间间隔应当相同。使用主动置换型移液器并避免气泡产生。 |
10 | 在每一微孔中加入200µl临时配置好的PNPP底物液。 |
11 | 室温（18-25℃）下振荡（500rpm）温育60min。 |
12 | 在每一微孔中加入50µl PNPP终止液以终止底物反应，轻轻振板以使溶液混合均匀。 |
13 | 加终止液后60min内405nm处读取OD值。 |
可选操作步骤（温育一整夜，样品A和样品B均适用）
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