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3.2 miRNA过表达载体的构建方法
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3.miRNAs功能检测—— 3.2 miRNA过表达载体的构建方法 | ||
3.2 miRNA过表达载体的构建方法 简介 构建miRNAs表达载体,实现miRNAs在细胞中稳定过表达,能够弥补瞬时转染持续时间短的不足,过表达的方式通常包括pri-miRNA,pre-miRNA与成熟miRNAs形式,莱德尔技术使用的是以下两种方式: ● pri-miRNA(含侧翼序列)的表达形式,Ⅱ型启动子载体; ● pre-miRNA的表达形式,U6启动子载体。 服务流程: ★ miRNAs序列分析; ★ PCR引物设计及合成; ★ PCR扩增pri-miRNA序列或者单链互补引物退火形成pre-miRNA序列; ★ 将片段克隆至Ⅱ型启动子载体或者U6启动子载体; ★ 测序以确保插入序列正确性; ★ 向客户提交测序结果与实验方法报告单。 客户提供: 待研究miRNA序列信息。 我们提供: 阳性克隆质粒,阳性克隆甘油菌,测序报告以及实验方法报告。 质量保证: 以测序报告为准的正确的插入序列。 |