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3.2 miRNA过表达载体的构建方法

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3.miRNAs功能检测—— 3.2 miRNA过表达载体的构建方法
 
3.2 miRNA过表达载体的构建方法
 
简介
构建miRNAs表达载体,实现miRNAs在细胞中稳定过表达,能够弥补瞬时转染持续时间短的不足,过表达的方式通常包括pri-miRNA,pre-miRNA与成熟miRNAs形式,莱德尔技术使用的是以下两种方式:
● pri-miRNA(含侧翼序列)的表达形式,Ⅱ型启动子载体;
● pre-miRNA的表达形式,U6启动子载体。
 
 
 
服务流程:
★ miRNAs序列分析;
★ PCR引物设计及合成;
★ PCR扩增pri-miRNA序列或者单链互补引物退火形成pre-miRNA序列;
★ 将片段克隆至Ⅱ型启动子载体或者U6启动子载体;
★ 测序以确保插入序列正确性;
★ 向客户提交测序结果与实验方法报告单。
 
客户提供:
待研究miRNA序列信息。
 
我们提供:
阳性克隆质粒,阳性克隆甘油菌,测序报告以及实验方法报告。
 
质量保证:
以测序报告为准的正确的插入序列。

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