【飞诺美色谱】Lux手性拆分之Fmoc保护氨基酸
时间：2024-12-02 阅读：96
多肽作为由多个氨基酸通过酰胺键相连形成的化合物，可通过基因重组表达、生物提取、化学合成等方法制备。而在化学合成多肽原料药的工艺开发中，保护氨基酸作为起始物料，其质量状况将直接影响到多肽药物质量。根据国家2023年2月发布的《化学合成多肽药物药学研究技术指导原则》（试行），Fmoc保护氨基酸中常见杂质信息如下（见表1）。
表1. Fmoc保护氨基酸中常见的杂质
| 杂质 | 描述 |
| 保护不氨基酸 | 游离氨基酸（未保护）或部分保护的氨基酸 |
| 手性异构体 | 含有手性中心的氨基酸可能存在，如D-氨基酸中存在L-氨基酸 |
| 二肽衍生物 | 如Fmoc-Leu-OH中存在Fmoc-Leu-Leu-OH |
| β-丙氨酸（Ala）杂质 | 在使用9-芴甲基N-琥珀酰亚胺碳酸酯（Fmoc-OSu）时，可能产生Fmoc-β-Ala-OH和Fmoc-β-Ala-AA-OH |
| 同分异构体 | 如亮氨酸（Leu）中存在异亮氨酸（I1e） |
针对其中涉及的手性异构体杂质，Lux系列提供多种键合型和涂敷型的多糖类手性固定相解决该类分离难题。
图1. Lux系列手性固定相示意图
多种手性固定相的筛选策略提供了互补的选择性需求，从而提高手性筛分的成功率。
表2. 19种常见Fmoc保护氨基酸手性分离
表3. 19种常见Fmoc保护氨基酸反相分离结果
参考文献：
1. 国家《化学合成多肽药物药学研究技术指导原则》（试行）.2023年2月
2. Merrifield R. B. J. Am. Chem. Soc., 1963, 85, 2149.
3. Carpino L.A. and Han G.Y. J. Org. Chem., 1972, 37, 3404.
4. Chankvetadze B. J. Chromatogr. A, 2012, 1269, 26.
5. Peng L., Jayapalan S., Chankvetadze B. and Farkas T.J. Chromatogr. A 2010, 1217, 6942.