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包虫病犬粪抗原检测试剂盒
犬粪包虫抗原检测试剂盒(酶联免疫法)
使用说明书
●用途意义
本试剂用于犬粪便中包虫抗原的检测。
●试剂组成
1.预包被板 96T; 7. 样品稀释液(5号液) 1支;
2.酶结合物 1支; 8. 终止液(6号液) 1支;
3.浓缩洗涤液
(2号液,用前以蒸馏水10倍稀释) 1支; 9. 阳性对照品 1支;
4.底物(3号液) 1支; 10.阴性对照品 1支;
5.显色剂(4号液) 1支; 11.使用说明书 1份
6.浓缩粪便处理液
(7号液,用前以蒸馏水等体积稀释) 1支;
● 操作程序
1. 样品处理: 犬粪样品需要预先低温冷冻七天以上,以灭活虫卵。取约1克犬粪(约黄豆量大小)加入1ml已稀释的粪便处理液,充分搅拌混匀,静置10分钟,再经5000rpm离心30分钟,取上清液检验。
2. 加样反应: 根据需要量取出预包被板。设阴性、阳性及空白对照各一孔;其中阴、阳对照孔分别加入阴性、阳性对照各100ul,空白对照孔加入样品稀释液(5号液)二滴。其它各样品孔先滴加样品稀释液(5号液)各一滴,再取犬粪上清液50ul加入板孔中。37℃下避光反应30分钟,甩去孔内液体。用已稀释的洗涤液洗涤四次,每次静止1分钟,拍干。
3. 加酶反应: 除空白孔外,各孔滴加酶结合物二滴。37℃下避光反应30分钟,甩去孔内液体。用已稀释的洗涤液洗涤三次,每次静止1分钟,拍干。
4. 显色反应: 每孔加底物(3号液)和显色剂(4号液)各一滴,37℃下避光反应10分钟,加终止液(6号液)一滴混匀,终止反应。
●结果判断
以空白对照调零,用酶标仪于450nm读取O.D值,待检孔O.D值大于阴性对照2.1倍者为阳性。当阴性对照O.D值低于0.07时按0.07计算。
●注意事项
1. 试剂盒在2-8℃下保存,每次取出时先平衡至室温后使用。滴瓶每次用后一定要将盖拧紧,各瓶盖之间切不可混用。各试剂盒之间不可混用。
2. 如犬粪难以溶解,应适当捣碎处理。
3. 浓缩洗涤液及浓缩粪便处理液若出现结晶时,应置37℃至溶解。
4. 应采集新鲜的犬粪样本进行测试。如不能及时检测,应将粪样放置低温冻存,防止腐败或反复冻融。
5. 对样本及相关物品应视为污染物,应依照实验室规范妥为处理,并注意个人防护如佩戴手套等。