1.

农残试剂配置

缓冲溶液：

取一包缓冲剂，

加入

500ml

蒸馏水，

溶解搅拌均匀，

密闭、

避光、

阴凉处保存。

显色剂：取显色剂一瓶，加入

15ml

缓冲溶液溶解，

4

℃冰箱中保存。

底物：取底物一瓶，加入

15ml

蒸馏水溶解，

4

℃冰箱中保存。

乙酰胆碱酯酶：

取乙酰胆碱酯酶一瓶，

用

3ml

缓冲溶液溶解，

 4

℃冰箱中保

存。

2.

样品处理

选取有代表性的蔬菜样品，

擦掉样品表面泥土，

剪成

1cm

见方碎片，

取样品

1g

，放入烧杯或提取瓶中，加入

5ml

缓冲溶液，振荡

1min

～

2min

，倒出提取液，

静置

3min

～

5min

，待用。

注意：

样品不可用水冲洗，

应擦去表面泥土等杂物后取样。

为了保证取样具有代

表性，

叶菜一般取来自不同植株叶片的叶尖部样本，

果菜从不同个体的表皮处取

样。

3.

对照溶液测试

在提取瓶中加入

2.5ml

缓冲溶液，再加入

100ul

酶液、

100ul

显色剂，摇匀

后于

37℃放置

15

分钟

(

每批样品的控制时间必须一致

)

。

15

分钟后再加入

100

μ

L

底物摇匀

,

此时检液开始显色反应

,

应立即倒入

1cm

比色皿，放入仪器比色池中，

将仪器调到测量界面

,

按操作指示面板按键区的

“对照”

按钮，

仪器开始做对照。

3

分钟后仪器自动对照完成，对照完成后将对照样取出，保持仪器界面不变。

注意：对照测试必须在*通道进行，对照测试△

A

应＞

0.3

，若对照测试

的结果小于以上数值时，仪器会自动提示“对照错误”

，须重新做对照，以保证

测量结果的准确性。

(

对照测试△

A<0.3

的原因：一是酶的活性不够，二是反应

温度太低。

)

4.

样品溶液测试

另取干净的提取瓶，放入

2.5ml

样品提取液，加入

100ul

酶液、

100ul

显色

剂，摇匀后于

37℃放置

15

分钟

(

放置的时间与对照液放置的时间必须一致

)

。

15

分钟后再加入

100

μ

L

底物摇匀

,

此时检液开始显色反应

,

应立即倒入

1cm

比色皿，

放入仪器比色池中，按操作指示面板按键区的“测量”按钮开始测量，

3

分钟后

仪器测量完成，显示测量结果。结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示，当蔬菜

样品提取液对酶的抑制率≥

50%

时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类

农药存在，样品为阳性结果，阳性结果的样品需要重复检验

2

次以上。

对阳性结果的样品，可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。

5.

说明

葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有

影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株（体）蔬

菜浸提。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株（体）蔬菜浸提的方法，减

少色素的干扰。