ELISA试剂盒的操作程序
时间:2017-09-18 阅读:1227
ELISA试剂盒操作程序
1. 分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其他各步操作相同)、规范品孔、待测样品孔。在酶标包被板上规范品孔中参加规范品50μl;在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。每孔参加酶标试剂50μl,空白孔除外。悄悄晃动混匀,37℃温育60分钟。
2. 测定:以空白孔调零,在450nm波长下丈量各孔的吸光度值(OD值)。测定应在加停止液后15分钟以内进行。
3. 依据elisa试剂盒免费代测规范品的浓度及对应的OD值核算出规范曲线的直线回归方程,再依据样品的OD值在回归方程上核算出对应的样品浓度。也能够运用各种应用软件来核算。应记住因为样品稀释了的,其实践浓度应该乘以总稀释倍数。
4. 弃去液体,甩干,每孔加满稀释后洗涤液,振动30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。
5. 每孔先参加显色剂A50μl,再参加显色剂B50μl,悄悄震动混匀,37℃避光显色15分钟.
6. elisa试剂盒取出酶标板,每孔加停止液50μl,停止反响(此时蓝色立转)。