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备注：本公司销售的所有产品仅用于生化科研试验
产品名称 :
一步法RT-PCR反转试剂盒
品牌 :
BIOMIGA
货号 :
RT0213-01
规格 :
20次/50次/100次
详细信息 :
产品简介
一步法RT-PCR试剂盒是为从总RNA或mRNA中特异性的反转和扩增目的RNA而设计的。该系统在一种优化反应体系中共用MMLV反转录酶和热启动Taq DNA聚合酶的预混液，能够检测长达4.0 kb的RNA目的片段。总RNA的用量可从0.01 pg到2 μg之间，该试剂盒为50 μl的反应体系。
试剂盒组分
产 品 | RT0213-00 | RT0213-01 | RT0213-02 | RT0213-03 |
Reactions | 5 | 20 | 50 | 100 |
Enzyme mix: MMLV RT/ Hot start Taq Mix | 5 μL | 20 μL | 50 μL | 100 μL |
2× Reaction mix （optimized bμffer contains dNTP and Mg2+） | 125 μL | 500 μL | 1.25 mL | 2×1.25 mL |
5 mM Magnesiμm Sμlfate | 125 μL | 500 μL | 1.0 mL | 2×1.0 mL |
dd H2O | 150 μL | 600 μL | 1.5 mL | 2×1.5 mL |
保存条件
该试剂盒-20°C保存，在此条件下可保存二年。
产品特点
方便的一管式设置
*的RT-PCR缓冲液及高效性
高度敏感性、特异性及重复性
推荐RT-PCR反应体系
建议用如下组成配制RT-PCR反应起始液：
组分 | 50 μl 体系 | 终浓度 |
2× Reaction mix | 25 μL | 1× |
Enzyme mix | 1.0 μL |
|
Forward Primer （10 μM） | 1.0 μL | 200 nM |
Reverse Primer （10 μM） | 1.0 μL | 200 nM |
RNA template | × μL | Variable （0.01pg - 2μg） |
Final Volμme （μL） | 50 μL | 用dd H2O补足50 μL体系 |
*如有必要，镁盐浓度可进一步优化。
1．将反应溶液在冰上解冻。
2．按下列热循环程序进行反应，以便cDNA合成之后立刻进行PCR扩增。
cDNA合成: 1 cycle: 40–50°C for 10 min
变性: 1 cycle: 94°C for 2 min
PCR 扩增: 40 cycles:
94°C for 15 s
55-65°C for 30 s
68°C for 1 min/kb
3．用凝胶电泳检测RT-PCR扩增产物。
