Agilent InfinityLab 二维液相色谱
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主动溶剂调制提供了一种基于阀的方法来解决二维液相色谱中维 (1D) 与第二维 (2D) 溶剂系统不兼容的问题。

中药 食药

摘要

二维液相色谱 (2D-LC) 方法开发中的一项重大挑战是维 (1D) 与第二维 (2D) 溶剂系统不兼容。在充满挑战的分离系统组合中,2D 中可观察到流穿峰、峰展宽或变形峰等体积过载效应。主动溶剂调制 (ASM) 提供了一种基于阀的方法来解决该问题,可提高 2D 中的分离度和灵敏度。本篇技术概述阐述了 ASM 的原理,并展示其在两种反相 (RP) 液相色谱分离组合及亲水相互作用液相色谱 (HILIC) 和 RPLC 组合中发挥的作用。先进

Agilent InfinityLab 二维液相色谱

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结论

2D-LC 方法开发中的一项重要挑战是 1D 与2D 溶剂系统不兼容。对于 1D 洗脱液中的分析物在 2D 色谱柱中保留性较低的分离系统组合,2D 中可能会观察到流穿峰、峰展宽或变形峰等体积过载效应。主动溶剂调制提供了一种基于阀的方法,在 2D 色谱柱前用 2D 流动相稀释 1D 洗脱液,解决了这一问题,从而实现了 2D 色谱柱头处的分析物集中。

在 PAH 的 RPLC-RPLC 分析中,未使用ASM 时将出现 2D 峰展宽和变形峰。在ASM 稀释因子为 2 的条件下使用 ASM 时,2D 色谱柱头实现分析物集中,从而获得了对称的 2D 窄峰。在多肽的 HILIC-RPLC 分析过程中,未使用 ASM 的2D 中出现了多肽的部分流穿。在 ASM 稀释因子为 5 的条件下使用 ASM 时,多肽实现了*保留。




参考文献

1. Stoll, D. R.; Carr, P. W. Two-Dimensional Liquid Chromatography: A State of the Art Tutorial. Analytical Chemistry 2017, 89, 519-531

2. Stoll, D. R.; et al. Active Solvent Modulation: A Valve-Based Approach To Improve Separation Compatibility in Two-Dimensional Liquid Chromatography. Analytical Chemistry 2017, 89, 9260-9267

3. Li, D.; Jakob, C.; Schmitz, O. Practical considerations in comprehensive two-dimensional liquid chromatography systems (LCxLC) with reversed-phases in both dimensions. Analytical and Bioanalytical Chemistry 2015, 407, 153-167

















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