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电泳带型分析

时间:2021-08-23      阅读:1445

那么下面上海金鹏分析仪器有限公司为大家简单介绍一下关于电泳带型分析:
DNA电泳需要进行带型分析,在实验过程中常会发现所得的带型出现在这样那样的问题。在此,我们对DNA带型做了相应的分析。
 

带型原因分析解决办法
弱带或无带上样的DNA量不够增加DNA的上样量,聚丙烯酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度稍高
DNA降解避免DNA的核酸酶污染
电泳时间过长,DNA跑出减短电泳时间,降低电压,增强凝胶浓度
EB染色的DNA,紫外光源不合适应用短波长(254nm),增强紫外灯灵敏度
DNA带缺失小DNA带走出凝胶减短电泳时间,降低电压,增强凝胶浓度
分子大小相近的DNA带不易分辨增加电泳时间,核准正确的凝胶浓度
DNA 变性电泳前请勿高温加热DNA链,以20mM NaCl Buffer稀释DNA
巨大DNA链,凝胶电泳不合适在脉冲凝胶电泳上分析
DNA带模糊DNA降解避免核酸酶污染
DNA上样量过多减少凝胶中DNA上样量
所用电泳条件不合适电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃,巨大DNA链,温度应<15℃,核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力
DNA样含盐过高电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐
有蛋白污染电泳前酚抽提去除蛋白
DNA变性电泳前勿加热,用20mM NaCl缓冲液稀释DNA
不规则DNA带迁移对于λ/Hind III片段COS位点复性电泳前加热DNA 65℃加热5-10分钟,然后在冰上冷却5分钟
电泳条件不合适电泳电压不超过20V/cm,温度<30℃,电泳缓冲液有足够的缓冲能力
DNA变性以20mM NaCl Buffer稀释DNA,电泳前勿加热

 
以上就是上海金鹏分析仪器有限公司为大家整理总结关于电泳带型分析。
 
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