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人β-淀粉样蛋白(1-42)检测试剂盒
产品详细
中文名称 | 人类β-淀粉样蛋白(1-42)检测试剂盒 |
英文名称 | Human Amyloidβ (1-42) Assay Kit |
产品货号 | 27711 |
产品规格 | 96T |
检测样本 | 人类脑脊液、细胞上清液、脑组织提取液 |
适应物种 | 人 |
预期用途 | 用于人类脑脊液、细胞上清液、脑组织提取液中Aβ(1-42)的定量检测 |
产品品牌 | 德国IBL |
供应商家 | 深圳市科润达生物工程有限公司 |
预期用途
人β-淀粉样蛋白(1-42)科研试剂盒可以用于人类脑脊液、细胞上清液、脑组织提取液中Aβ(1-42)的定量检测。
若细胞上清液中含有胎牛血清,胎牛血清中含有类似Aβ(1-42)的物质有可能被检测到,所以我们强烈建议设置阴性对照组。
血清或者血浆中的Aβ(1-42)由于该试剂盒的灵敏度可能检测不到,血清含有干扰物可能干扰实验结果
试剂盒组成成分
微孔板 | 12×8 |
标记抗体 30× | 1×0.4ml |
标准品 | 2×0.5ml |
EIA 缓冲液 | 1×30ml |
标记抗体稀释液 | 1×12ml |
显色剂(TMB) | 1×15ml |
终止液 | 1×12ml |
洗涤液(40×) | 1×50ml |
试剂盒检测原理
人β-淀粉样蛋白(1-42)科研试剂盒是一种夹心法的ELISA试剂盒,使用了两种高特异性的抗体。TMB作为显色剂,终溶液所显示的颜色强度与样品中Aβ(1-42)的量成正比。
检测实验所需材料(试剂盒不提供)
★ | 酶标仪(450nm) |
★ | 微量移液器和吸头 |
★ | 量筒和烧杯 |
★ | 冰箱(4℃) |
★ | 蒸馏水 |
★ | 洗瓶、吸水纸 |
★ | 坐标纸 |
★ | 标准品稀释管、一次性试管 |
检测试剂盒储存条件与有效期
储存条件:2-8℃,显色剂需避光保存且避免与金属接触。有效期:在瓶身上有详细说明。有试剂使用前先平衡至室温在使用 。
检测试剂盒实验步骤
使用前,所有样品应平衡至室温,大约30min,然后充分混匀,确保试剂质量无变化,标准曲线和样品检测同时进行
试剂 | 检测样品 | 标准品 | 检测样品对照孔 | 试剂对照孔 |
检测样品 100μL | 稀释标准品(1-7管)100μL | EIA缓冲液(第8管) 100μL | EIA缓冲液100μL | |
盖板,4℃下温育过夜 | ||||
洗板7次 | ||||
酶标抗体 | 100μL | 100μL | 100μL | - |
盖板,4℃下温育60min | ||||
洗板9次 | ||||
显色剂 | 100μL | 100μL | 100μL | 100μL |
室温避光温育30min | ||||
终止液 | 100μL | 100μL | 100μL | 100μL |
加终止液后30min内450nm处读取OD值 |
确定好空白对照孔,并在相应的微孔中加入100μL EIA缓冲液。
确定好样品对照孔,检测样品孔和标准品孔,然后分别将100μL样品对照品、检测样品和稀释好的标准品加入到相应的微孔中。
盖板,4℃下温育过夜
用洗涤瓶洗板,在微孔中加入洗涤液浸泡15-30秒,弃去洗涤液。重复7次,后在吸水纸上拍干。如果是用洗板机洗板时,用洗板机洗四次后,再用洗涤瓶洗3次。
每孔加100μL酶标抗体,除试剂空白对照孔外
盖板,4℃下温育60min
按照步骤4)洗板9次
将所需量的显色剂加入到试管中,然后在每一微孔中加入100μL显色剂。为了避免污染,请勿将剩余试剂在倒入原装试剂瓶中。
室温避光温育30min,加入显色剂后溶液颜色会变成蓝色
在每孔加100μL终止液,此时溶液颜色会变成黄色
擦去微孔板底部的污点或水滴,终止液加入后30min内,在酶标仪450nm处读数
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