白喉棒状杆菌毒素ELISA检测试剂盒

棒状杆菌是一种不规则形状的需氧非芽孢形成的革兰氏阳性杆状体(0.5-1µm厚，长2-6µm)。它们包括皮肤共生体、机会病原体和几种主要病原体，包括白喉棒状杆菌。一般来说，它们是从含有亚碲酸盐的选择性培养基上的咽拭子中分离出来的。由白喉梭菌引起的细菌感染有两种形式。呼吸性白喉通常是由产毒素（产毒）毒株引起的；皮肤疾病可由产毒或非产毒菌株引起。在呼吸道形式的疾病中，形成一种膜；这种膜通常在喉部或扁桃体上可见。当细胞膜阻塞呼吸时，人可能会死于窒息。其他并发症是由白喉毒素（心肌炎，神经麻痹）的远程作用引起的。皮肤白喉通常是轻微的，通常由非明显的溃疡或浅层溃疡组成，很少涉及毒性并发症（1-2%的产毒菌株感染）。白喉是疫苗接种前时期儿童死亡的最常见原因之一。自从大多数工业化国家引进白喉类毒素疫苗（福尔马林灭活白喉毒素）并广泛使用以来，这种疾病现在的特点是散发病例和低强度的间歇性暴发。但是，最近在一些东欧国家的白喉流行再次引起人们对这种被遗忘的“疾病”的注意，而且，这些病例大多数发生在青少年和成人中，而不是儿童。控制白喉的有效方法是通过预防性的白喉类毒素免疫。类毒素抗体可防止毒素的作用；经免疫接种的人可被产生毒素的白喉菌株感染，但不会出现白喉的系统性表现。通过早期、适当的治疗，可以改善疾病的结果。及时识别该疾病对于确保早期、适当的白喉抗毒素治疗很重要。

【检测原理】

特异性抗体的定量免疫酶学测定是基于ELISA（酶联免疫吸附试验）技术。微孔板上包被特定的抗原，以结合样本的相应抗体。洗涤微孔以去除所有未结合的样本材料后，添加酶联物，与捕获的抗体结合。在第二个洗涤步骤中，未结合的共轭物被去除。通过加入四甲基联苯胺(TMB)底物，得到蓝色反应产物，可以观察到结合结合物形成的免疫复合物。该产品的强度与样本中特异性抗体的数量成正比。加入终止液以终止反应，蓝色变成了黄色。使用酶标仪器读取450/620nm处的吸光度。

【试剂盒组成】

1）微孔板              12x8，包被白喉棒状杆菌毒素（类毒素）抗原

2）样本稀释液          1×100ml，磷酸盐缓冲液（10mM），pH 7.2 ± 0.2，即用型

3）终止液              1×15ml，硫酸，0.2mol/L，即用型

4）洗涤浓缩液          20倍浓缩，磷酸盐缓冲液（0.2M），1×50ml，pH 7.2 ± 0.2

5）酶联物              1×20ml，过氧化物酶标记的人IgG抗体，即用型

6）底物液              1×15ml，3,3’,5,5’-四甲基联苯胺（TMB），即用型

7）标准品       4x2ml，即用型（标准品按照“第一个白喉抗毒素人体IgG国际标准”进行校准）

标准品A           0.000 IU/mL   蓝盖

标准品B           0.015 IU/mL   绿盖

标准品C           0.075 IU/mL   黄盖

标准品D           0.150 IU/mL   红盖

8）封板纸             1x

9）使用说明书         1x

【所需的材料和设备】（未提供）

1）酶标仪

2）37℃培养箱

3）手动或自动洗板装置

4）移液器：10-1000µL

5）涡旋混合器

6）蒸馏水

7）一次性试管

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