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百日咳杆菌毒素IgG抗体检测试剂盒
通用名称:百日咳杆菌毒素IgG检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:Bordetella PT IgG ELISA
【产品规格】
96T
【预期用途】
试剂盒可用于人血清和血浆(柠檬酸盐、肝素)中百日咳杆菌毒素IgG的定量检测。
【检测原理】
此固相百日咳杆菌毒素IgG抗体检测试剂盒利用的是夹心法。微孔内包被了抗原,用对人IgG有特异性的酶标抗体来检测样品中的特异性抗体(此抗体可结合到包被抗原上)。底物反应后,所显示的颜色的强度与检测到的IgG特异性抗体的量正比。样品的结果可直接用标准曲线获得。
检验步骤
1) 加100µL标准品、质控品、已稀释样本至相应孔中,A1为空白。
2) 封板后室温(37℃)温育60分钟。
3) 移去封板纸,弃去孔中液体。300µL/孔洗涤液洗板3次,在吸水纸上拍干。(机洗为350µL/孔,5次)
4) 加入100µL/孔酶联物,A1不加。
5) 封板后室温(20℃-25℃)避光温育30分钟。
6) 重复步骤3
7) 加100µL/孔TMB底物液。
8) 室温(20℃-25℃)避光温育15分钟。
9) 在每一微孔中加入100µLTMB终止液以终止底物反应。轻轻摇动微孔板以使试剂混合均匀。此时,颜色蓝色变成黄色。
10) 加100µL/孔终止液后,在30分钟内于450/620 nm处测OD值。
【结果计算】
为了使分析方法有效,必须满足以下标准:§
空白A1吸光度值<0.100§
标准品A吸光度值<0.200§
标准品B吸光度值>标准品A§
标准品C吸光度值>标准品B§
标准品D吸光度值>标准品C§
标准品E吸光度值>1.000§
低质控结果IU/mL在标签范围内的§
高质控结果IU/mL在标签上显示的范围内
标准品A<标准品B<标准品C<标准品D<标准品E
如果不满足这些标准,则测试无效,必须重复
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