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聚合物基质液相色谱柱选择的条件主要有这几点

时间:2022-08-22      阅读:1234

   聚合物基质液相色谱柱在流动相发生变化时都会出现膨胀或收缩。用于HPLC的高交联度聚合物填料,其膨胀和收缩要有限制。溶剂或小分子容易渗入基质中,因为小分子在基质中的传质比在陶瓷性基质中慢,所以造成小分子在这种基质中柱效低。对于大分子像蛋白质或合成的高聚物,效能比得上陶瓷性基质。因此,广泛用于分离大分子物质。
 
  聚合物基质液相色谱柱选择的条件:
  A含碳量
  含碳量指的是硅胶表面键合相的比例,与比表面积和键合覆盖度等有关。高含碳量进步柱容量、分辨率及分析时间,用于要求高分离度的复杂样品;低含碳量分析时间短、展现不同的选择性,用于快速分析简单样品及需要高含水活动相条件的样品。
 
  B孔径和比表面积
  吸附介质是多孔的颗粒,尽大多数的反应表面于孔内。因此,分子必须进进孔内才能被吸附和分离。
  孔径和比表面积是相辅相成的两个概念。孔径小比表面积大,反之亦然。比表面积大,增加样品与键合相之间的反应,增加保存,上样量和复杂成分的分离度;比表面积小,平衡时间快,适合梯度分析。

聚合物基质液相色谱柱

  C颗粒粒径

  粒径越小柱效越高、分离度越高,但同时会导致较高柱压降。
 
  D填料基质
  1、硅胶基质:纯度高本钱低,强度大,化学修饰轻易,但pH值范围有限。大多硅胶基质填料在pH2-8之间稳定,但经过特殊修饰的硅胶键合相可以稳定在一定范围内。
 
  2、聚合物基质:应用pH值范围宽,温度稳定,机械强度小。
  B颗粒外形
  填料都是球形颗粒,但有时是不规则的颗粒。球形颗粒提供较低的柱压、较高的柱效和稳定性以及较长的柱寿命在使用高粘度的活动相时;不规则颗粒有较大比表面积和相对低廉的价格。
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