谷胺酰胺合成酶(GS)试剂盒 说明书 技术文章
时间:2019-06-06 阅读:2069
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谷氨酰胺合成酶(Glutamine Synthetase,GS)活性检测试剂盒
商品货号:MS1807
英文名称:Micro Glutamine Synthetase(GS)Assay Kit
别名:谷氨酰胺合成酶试剂盒 GS Kit 谷氨酰胺合成酶(GS)试剂盒 谷氨酰胺合成酶(GS)测试盒
检测方法:微量法
商品货号: | 商品品牌: | 规格 | 基本售价 | 选择规格 |
---|---|---|---|---|
MS1807-100管/48样 | 索桥生物 | 100管/48样 | ¥550.00元 |
- 产品详细介绍
测定意义:
GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式。
测定原理:
GS在ATP和Mg2+存在下,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺进一步转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下与铁形成的络合物在540nm处有大吸收峰,可用分光光度计测定。
- 产品说明书
货号: QS1807 规格:50管/24样
谷胺酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)试剂盒说明书 可见分光光度法
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,催化铵离子和谷 氨酸合成谷氨酰胺,不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要储 存和运输形式。
测定原理:
GS 在 ATP 和 Mg2+存在下,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺进一步转化为 γ ─ 谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下与铁形成红色的络合物;该络合物在 540nm 处有大吸收峰, 可用分光光度计测定。
自备实验用品及仪器:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰和 蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:30mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:10mL×1 瓶,-20℃保存。
试剂二:10mL×1 瓶,-20℃保存。
试剂三:粉剂×2 瓶,-20℃保存。用时每瓶加入 5mL 蒸馏水充分溶解备用,用不完的试 剂仍-20℃保 存。
试剂四:10mL×1 瓶,4℃避光保存。
样本测定的准备:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超 声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃ 离心 10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织, 加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
测定步骤:
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。
2、在 EP 管中加入下列试剂:
试剂名称(μ L) 测定管 对照管
试剂一 320
试剂二 320
试剂三 140 140
样本 140 140
混匀,37℃(哺乳动物)或 25℃(其他物种)准确水浴 30min
试剂四 200 200
混匀,静置 10min 后,5000g,25℃离心 10min,取上清液测定 540nm 处的吸光值 A。△A=A 测 定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。
GS 活力单位的计算:
1、血清(浆)GS 活性 单位定义:每 mL 血清(浆)在每 mL 反应体系中每 min 使 540 下吸光值变化 0.01 定义为一个 酶活力单位。
计算公式:
GS(U/mL)=Δ A×V 反总÷V 样÷0.01÷T =19×Δ A
2、组织、细菌或细胞 GS 活性
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每 mg 组织蛋白在每 mL 反应体系中每 min 使 540nm 下吸光值变化 0.01 定义为一 个酶活力单位。
GS(U/mg prot)=Δ A×V 反总÷(Cpr×V 样)÷0.01÷T =19×Δ A÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每 g 组织在每 mL 反应体系中每 min 使 540nm 下吸光值变化 0.01 定义为一个酶 活力单位。
GS(U/g 鲜重)=Δ A×V 反总÷(W× V 样÷V 样总)÷0.01÷T =19×Δ A÷W
(3)按细菌或细胞密度计算 单位定义:每 1 万个细菌或细胞在每 mL 反应体系中每 min 使 540nm 下吸光值变化 0.01 定义 为一个酶活力单位。
GS(U/10^4 cell)=Δ A×V 反总÷(500×V 样÷V 样总)÷0.01÷T =0.038×Δ A
V 反总:反应体系总体积,0.8mL; V 样:加入样本体积,0.14mL;V 样总:加入提取液体积, 1 mL;T:反应时间,30 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或 细胞总数,500 万。
系列产品及单价
氮代谢系列 | ||||
QS1800 | 硝酸还原酶(NR)测试盒 | 可见分光光度法 | 50管/24样 | 240 |
MS1800 | 硝酸还原酶(NR)测试盒 | 微量法 | 100管/48样 | 450 |
QS1801 | 谷氨酸合成酶(GOGAT)测试盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | 500 |
MS1801 | 谷氨酸合成酶(GOGAT)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 950 |
QS1802 | 谷氨酰胺酶(GLS)测试盒 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | 580 |
MS1802 | 谷氨酰胺酶(GLS)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 1100 |
QS1803 | 谷氨酸脱氢酶(GDH)测试盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | 580 |
MS1803 | 谷氨酸脱氢酶(GDH)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 1100 |
QS1805 | 水土中亚硝酸盐含量测试盒 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | 140 |
MS1805 | 水土中亚硝酸盐含量测试盒 | 微量法 | 100管/48样 | 270 |
QS1806 | 食品中亚硝酸盐含量测试盒 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | 200 |
MS1806 | 食品中亚硝酸盐含量测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 380 |
QS1807 | 谷氨酰胺合成酶(GS)测试盒 | 可见分光光度法 | 50管/24样 | 280 |
MS1807 | 谷氨酰胺合成酶(GS)测试盒 | 微量法 | 100管/48样 | 550 |
QS1808 | 植物硝态氮测试盒 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | 360 |
MS1808 | 植物硝态氮测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 700 |
QS1811 | 植物氨态氮测试盒 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | 500 |
MS1811 | 植物氨态氮测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 960 |
QS1812 | 尿素氮测试盒 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | 70 |
MS1812 | 尿素氮测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 100 |
QS1813 | 亚硝酸还原酶(NiR)测试盒 | 可见分光光度法 | 50管/24样 | 650 |
MS1813 | 亚硝酸还原酶(NiR)测试盒 | 微量法 | 100管/48样 | 1250 |
QS1814 | 脲酶(UE)测试盒 | 可见分光光度法 | 50管/24样 | 380 |
MS1814 | 脲酶(UE)测试盒 | 微量法 | 100管/48样 | 750 |