脂肪酸合成酶(FAS)活性试剂盒说明书 技术文章
时间:2019-06-06 阅读:2267
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脂肪酸合成酶(Fatty Acid Synthase,FAS)活性试剂盒
商品货号:QS1108
英文名称:Fatty Acid Synthase (FAS) Assay Kit
别名:脂肪酸合成酶试剂盒 FAS Kit 脂肪酸合成酶(FAS)试剂盒 脂肪酸合成酶(FAS)测试盒
检测方法:常量法
商品货号: | 商品品牌: | 规格 | 基本售价 | 选择规格 |
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QS1108-10 管/9 样 | 索桥生物 | 10 管/9 样 | ¥1200.00元 | |
QS1108-25管/24样 | 索桥生物 | 25管/24样 | ¥2000.00元 | |
QS1108-50管/48样 | 索桥生物 | 50管/48样 | ¥3200.00元 |
- 产品详细介绍
测定意义:
FAS是脂肪酸合成关键酶,催化乙酰辅酶A和丙二酰辅酶A而生成长链脂肪酸。FAS普遍表达于各种组织细胞中,在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。
测定原理:
FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH生成长链脂肪酸和NADP+;NADPH在340nm有吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm 光吸收下降速率,计算FAS活性。
- 产品说明书
货号:QS1108-50 规格:50 管/48 样
脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)活性试剂盒说明书 紫外分光光度法
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
FAS 是脂肪酸合成关键酶,催化乙酰辅酶 A 和丙二酰辅酶 A 而生成长链脂肪酸。FAS 普遍 表达于各种组织细胞中,在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。
测定原理:
FAS 催化乙酰 CoA、丙二酰 CoA 和 NADPH 生成长链脂肪酸和 NADP+;NADPH 在 340nm 有吸收 峰,而 NADP+没有;通过测定 340nm 光吸收下降速率,计算 FAS 活性。
自备实验用品及仪器:
研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL 石英比色皿、可调式移液枪和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 50mL×1 瓶,-20℃保存。用前 1 d 取出置于 4℃充分解冻后混匀。
试剂二:粉剂×1 支。临用前加入 1100 μ L 试剂四,充分溶解,用不完的试剂分装后-20℃ 保存,禁止反复冻融。
试剂三:粉剂×1 支,4℃避光保存。临用前加入 1100 μ L
试剂四,充分溶解,用不完的 试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四:液体 50mL×1 瓶, 4℃保存。
试剂五:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加入 2100μ L 试剂四,充分溶解,用不完的试剂 分装后-20℃避光保存,禁止反复冻融。
粗酶液提取:
1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加 入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆。12000g,4℃离心 40min,取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时 间 3min);然后 12000g,4℃,离心 40min,取上清置于冰上待测。
3. 血清等液体:直接测定。
FAS 测定操作:
1. 分光光度计预热 30min,调节波长到 340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂四置于 40℃水浴中预热 30 min。
3. 测定管:在 1mL 石英比色皿中依次加入 100μ L 上清液、20μ L 试剂二、20μ L 试剂三、820μ L 试剂四和 40μ L 试剂五,迅速混匀后于 340nm 处测定吸光值,记录第 30s 和 90s 时吸光值,分 别记录为 A1 和 A2。△A 测=A1-A2。
FAS 活性计算公式:
(1)按照蛋白浓度计算 活性单位定义:37℃中每毫克蛋白每分钟氧化 1nmol NADPH 为 1 个酶活单位。
FAS(nmol/min/mg prot) =(△A÷ε ÷d×V 反总×109 ) ÷(Cpr×V 样)÷T =1608×△A÷Cpr
(2)按照样本质量计算
活性单位定义:37℃中每克组织每分钟氧化 1nmol NADPH 为 1 个酶活单位。
FAS(nmol/min/g 鲜重) = (△A÷ε ÷d×V 反总×109 ) ÷(W×V 样÷V 样总)÷T =1608×△A ÷W
(3)按细胞数量计算
活性单位定义:37℃中每 104个细胞每分钟氧化 1nmol NADPH 为 1 个酶活单位。
FAS(nmol /min/104 cell) = (△A÷ε ÷d×V 反总×109 ) ÷(细胞数量×V 样÷V 样总)÷T =1608×△A ÷细胞数量
(4)按液体体积计算
活性单位定义:37℃中每毫升样本每分钟氧化 1nmol NADPH 为 1 个酶活单位。
FAS(nmol /min/mL) =(△A÷ε ÷d×V 反总×109 ) ÷V 样÷T =1608×△A
ε :NADPH 摩尔消光系数,6.22×103 /mol/cm;d:比色皿光径,1 cm;V 反总:反应体系总体 积,1000μ L=0.001 L;Cpr:上清液蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;V 样:加入反应 体系中上清液体积,100μ L=0.1 mL;T:反应时间,1min。
系列产品及单价
辅酶Ⅱ系列 | ||||
QS1100 | 辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒 | 可见分光光度法 | 50管/24样 | 550 |
MS1100 | 辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒 | 微量法 | 100管/48样 | 1000 |
QS1101 | NADP磷酸酶(NADPase)测试盒 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | 520 |
MS1101 | NADP磷酸酶(NADPase)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 980 |
QS1102 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)/葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测试盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | 160 |
MS1102 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)/葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 300 |
QS1103 | 胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)测试盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | 260 |
MS1103 | 胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 500 |
QS1104 | NADP苹果酸酶(NADP-ME)测试盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | 320 |
MS1104 | NADP苹果酸酶(NADP-ME)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 600 |
QS1105 | NAD-苹果酸酶(NAD-ME)测试盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | 350 |
MS1105 | NAD-苹果酸酶(NAD-ME)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 650 |
QS1106 | 6-磷酸葡糖糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | 750 |
MS1106 | 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 1400 |
QS1107 | 肌酸激酶(CK)测试盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | 820 |
MS1107 | 肌酸激酶(CK)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 1500 |
QS1108-10 | 脂肪酸合成酶(FAS)测试盒 | 紫外分光光度法 | 10管/9样 | 1200 |
QS1108-25 | 脂肪酸合成酶(FAS)测试盒 | 紫外分光光度法 | 25管/24样 | 2000 |
QS1108-50 | 脂肪酸合成酶(FAS)测试盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | 3200 |
MS1108 | 脂肪酸合成酶(FAS)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 6000 |
QS2508 | 蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | 1600 |
MS2508 | 蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 3000 |
QS1110 | 硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)测试盒 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | 250 |
MS1110 | 硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 450 |
QS1111 | 谷胱甘肽还原酶(GR)测试盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | 260 |
MS1111 | 谷胱甘肽还原酶(GR)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 500 |