乳酸含量(Lactic Acid ,LA )试剂盒 说明 技术文章
时间:2019-06-13 阅读:5650
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乳酸含量(Lactic Acid ,LA )试剂盒
商品货号:QS2206
英文名称:LA Assay Kit
别名:乳酸含量试剂盒 LA Kit 乳酸含量(LA)试剂盒 乳酸含量(LA)测试盒
检测方法:常量法
商品货号: | 商品品牌: | 规格 | 基本售价 | 选择规格 |
---|---|---|---|---|
QS2206-50管/24样 | 50管/24样 | ¥650.00元 |
产品详细介绍
测定意义:
乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物,与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关,乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。
测定原理:
乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸,同时使NAD+还原生成NADH和H+,H+传递给PMS生成的PMSH2还原INT生成红色物质,在530nm处有特征吸收峰。
产品说明书
货号:QS2206 规格:50 管/24 样
乳酸含量(lactic acid ,LA )试剂盒说明书 可见分光光度法
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物,与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能 量代谢密切相关,乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。
测定原理:
乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸,同时使 NAD+还原生成 NADH 和 H +,H +传递给 PMS 生成的 PMSH2还原 INT 生成红色物质,在 530nm 处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、研钵、离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。
试剂组成和配制:
提取液:液体 55mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 8mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 12mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×1 支,-20℃避光保存。临用前加入 1.2mL 蒸馏水充分溶解。
试剂四:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加 12mL 蒸馏水充分溶解。
试剂五:粉剂×1 支,4℃避光保存。
标准品:液体×1 支,4℃保存。
显色液:临用前根据用量按照提取液(V):试剂三(V):试剂四(V):试剂五(m)=1: 0.3:3:15(mg)的比例充分混匀。
样本处理:
1. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL 提 取液)加入提取液,冰浴匀浆后于 4℃,12000g 离心 10min,取上清测定。
2. 细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细 胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min); 于 4℃,12000g 离心 10min,取上清测定。
3. 血清:直接测定。
测定操作:
空白管 | 样品对照管 | 样品测定管 | 标准对照管 | 标准测定管 | |
样品(μ L) | 50 | 50 | |||
标准品(μ L) | 50 | 50 | |||
H2O(μ L) | 500 | 300 | 450 | 300 | 450 |
试剂一(μ L) | 150 | 150 | |||
试剂二(μ L) | 200 | 200 | 200 | 200 | 200 |
显色液(μ L) | 300 | 300 | 300 | 300 | 300 |
充分混匀,于 37℃反应 30min,于 1mL 玻璃比色皿,空白管调零,测定 530nm 处吸光值,分别记为 A1,A2,A3,A4,△A 样=A2-A1;△A 标= A4-A3 |
注意:空白管、标准对照管和标准测定管只需测定一次
计算公式:
1. 按照蛋白含量计算
LA 含量(μ mol/mg prot)=△A 样÷△A 标×C 标÷ Cpr =2×△A 样÷△A 标÷ Cpr
2. 按照样本质量计算
LA 含量(μ mol/g)=△A 样÷△A 标×C 标÷ W =2×△A 样÷△A 标÷ W
3. 按照细胞数量计算
LA 含量(μ mol/104 cell)=△A 样÷△A 标×C 标÷ 细胞数量 =2×△A 样÷△A 标÷ 细胞数量
4. 按照液体体积计算
LA 含量(μ mol/mL)=△A 样÷△A 标×C 标
=2×△A 样÷△A 标
C 标:标准品浓度,2mmol/L ;W:样本质量,g/mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL
注意事项:
1. 空白管、标准对照管、标准测定管只需做一次。
2. 若吸光值超过 1.2,请进行适当的稀释后再进行测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。
3. 低检出限为 1.8μ mol/L。
三羧酸循环系列 | 单价 | |||
QS2100 | α酮戊二酸脱氢酶(α-KGDH)测试盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | 720 |
MS2100 | α酮戊二酸脱氢酶(α-KGDH)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 1400 |
QS2101 | 柠檬酸(CA)含量测试盒 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | 350 |
MS2101 | 柠檬酸(CA)含量测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 690 |
QS2102 | 琥珀酸脱氢酶(SDH)测试盒 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | 260 |
MS2102 | 琥珀酸脱氢酶(SDH)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 500 |
QS2103 | 丙酮酸脱氢酶(PDH)测试盒 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | 720 |
MS2103 | 丙酮酸脱氢酶(PDH)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 1400 |
QS2104 | 线粒体异柠檬酸脱氢酶(ICDHm)测试盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | 530 |
MS2104 | 线粒体异柠檬酸脱氢酶(ICDHm)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 1000 |
QS2106-50 | 乙酰辅酶A测试盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | 3200 |
QS2106-25 | 乙酰辅酶A测试盒 | 紫外分光光度法 | 25管/24样 | 2000 |
MS2106 | 乙酰辅酶A测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 5800 |
QS2107-50 | 线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | 2500 |
QS2107-25 | 线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒 | 紫外分光光度法 | 25管/24样 | 1500 |
MS2107 | 线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 4700 |
QS2206 | 乳酸含量(LA)测试盒 | 可见分光光度法 | 50管/24样 | 650 |
MS2206 | 乳酸含量(LA)测试盒 | 微量法 | 100管/48样 | 1280 |
QS2204 | 丙酮酸(PA)含量测试盒 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | 300 |
MS2204 | 丙酮酸(PA)含量测试盒 | 微量法 | 100管/96样 | 580 |