产品简介

磷酸化蛋白提取试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白，试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂，作用较为强烈，可快速获得总蛋白，可用于免疫印迹实验等基础研究实验，由于含有上述的酶抑制剂，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品仅用于科研。

产品组成:

操作方法:
1、组织总蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF；混匀，放置在冰上备用；
称取0.1g的新鲜组织，放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处，用眼科剪将组织块尽可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直至没有明显的组织块，这个过程注意冰上操作；
将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g离心30min；
吸取上清至新的管中；
进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
（提取好的蛋白建议保存于-80 oC，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。)
2、细胞总蛋白的提取
裂解液的用量：107个细胞需要裂解液1ml；
贴壁细胞：弃去培养基，用冷的PBS洗两次，弃去PBS，然后加入计算好的细胞裂解液；在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞，
将刮离的细胞裂解液移入EP管中，颠倒裂解20-30min
悬浮细胞：4 oC 400g离心收集细胞，用冷的PBS洗两次细胞，同样按细胞数加入裂解液，
涡旋10s，放置冰上裂解10min，重复3-4次；
裂解完毕之后，将细胞裂解液4 oC 12000g离心30min；
将上清移入新的EP管中；
进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
（提取好的蛋白建议保存于-80 oC，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。)

注意事项：
实验过程，所有试剂都要需要预冷或者即融，保证操作过程中的低温环境；
PSMF（有毒）现用现加，因为PMSF在水溶液中会快速降解；

备注：以上数据均来自公开文献, Solarbio暂未进行独立验证, 仅供参考。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.

公司简介

上海索莱宝生物科技有限公司是一家集销售生化试剂、实验耗材、自产分子生物学产品为一体，并能提供的专业性生物科技公司。公司秉承“以客户为中心，以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念，在依靠客户的大力支持和员工的不懈努力下获得了快速的成长。公司织结构清晰，内部管理科学，拥有一支既分工细致又高度合作的年轻化队伍，保持了各个部门之间的高效合作运转，充分保障了公司在充满竞争的市场中处于地位。公司注重与*合作，目前已与Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf等企业结成紧密的合作伙伴关系，代理其世界的*产品，并在全国各地设有分销机构。我们将以高度的责任感和出色的产品质量为客户提供高品质的产品和实验技术解决方案。丰富的经验、优良的品质、充足的库存、准确的交货时间、竞争力的价格，所有这些都保证了我们向您提供的是专业的服务！立足北京，上海，*，随着产品营销战略的不断延伸，我们将逐步发展成为*的专业性生物科技公司。我们希望能够和尊敬的客户一起，利用各自的资源优势和勇于进取的敬业精神，为中国生命科学研究的发展作出更多的贡献。为了更好、更全面的发展，现公司正在诚招各地代商和招聘若干销售、研发人员，欢迎垂询并期待您的加入！

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邮  箱：solarbio

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