产品简介

产品简介：

线粒体提取试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体。适合于动物软组织（肝或脑组织）和硬组织（肌肉）以及培养细胞的线粒体的制备。其制备物产量高，可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。

操作步骤：

1. 样本处理 a. 组织匀浆：称取100~200 mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等，PBS或生理盐水冲洗，洗净血水，滤纸吸干，用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer，0℃冰浴上下研磨组织20次； b. 培养细胞匀浆：消化细胞，PBS洗涤，800g离心5~10 min收集细胞，计数。每次提取需要5×10⁷个细胞，加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬细胞，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，0℃冰浴研磨30~40次。

2. 将组织或细胞匀浆物转移到离心管，4℃，1000g 离心5 min。

3. 取上清，转移至新的离心管中，4℃，1000g再次离心5 min。

4. 取上清，转移至新的离心管中，4℃， 12,000 g 离心10 min。离心后的上清含胞浆成分，可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管，线粒体沉淀在管底。

5. 往线粒体沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重悬线粒体沉淀，4℃，1000 g 离心5 min。

6. 取上清，转移至新的离心管中，4℃， 12,000 g 离心10 min。弃上清，高纯度的线粒体沉淀在管底。

7. 用50 -100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀，立即使用或-70℃保存。

注意事项：

1. 为保证获得完整的线粒体，务必做到：第一，全程低温操作；第二，快速；第三，在不破坏亚细胞器的情况下破碎细胞，这是制备线粒体的最关键环节。与组织块相比，培养细胞特别是贴壁培养细胞在用玻璃匀浆器匀浆时较难破壁，因而要选用小容量玻璃匀浆器、间隙严密的研杵上下研磨培养细胞。

2. 以离心力g计算正确的离心速度，不同的离心机可据此精确计算离心速度。3. 进行Western Blot和2D-胶电泳，可直接加入上样缓冲液裂解线粒体。 转速与离心力换算：     G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]^２ G为离心力，一般以ｇ（重力加速度）的倍数来表示； [rpm]^２即：转速的平方； R为半径，单位为厘米。

备注：以上数据均来自公开文献, Solarbio暂未进行独立验证, 仅供参考。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.

公司简介

上海索莱宝生物科技有限公司是一家集销售生化试剂、实验耗材、自产分子生物学产品为一体，并能提供的专业性生物科技公司。公司秉承“以客户为中心，以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念，在依靠客户的大力支持和员工的不懈努力下获得了快速的成长。公司织结构清晰，内部管理科学，拥有一支既分工细致又高度合作的年轻化队伍，保持了各个部门之间的高效合作运转，充分保障了公司在充满竞争的市场中处于地位。公司注重与*合作，目前已与 Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf等企业结成紧密的合作伙伴关系，代理其世界的*产品，并在全国各地设有分销机构。我们将以高度的责任感和出色的产品质量为客户提供高品质的产品和实验技术解决方案。丰富的经验、优良的品质、充足的库存、准确的交货时间、竞争力的价格，所有这些都保证了我们向您提供的是专业的服务！立足北京，上海，*，随着产品营销战略的不断延伸，我们将逐步发展成为*的专业性生物科技公司。我们希望能够和尊敬的客户一起，利用各自的资源优势和勇于进取的敬业精神，为中国生命科学研究的发展作出更多的贡献。为了更好、更全面的发展，现公司正在诚招各地代商和招聘若干销售、研发人员，欢迎垂询并期待您的加入！

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