水产品中孔雀石绿速测盒（柱色谱法）

水产品中孔雀石绿速测盒（柱色谱法）

【产 品 简 介】

孔雀石绿(MG)和结晶紫(CV)具有高毒性、高残留和致癌、致畸、致突变等特点,当其进入生物体内，就会产生具有更强危害的隐性孔雀石绿(LMG)和隐性结晶紫(LCV)。鉴于孔雀石绿和结晶紫的危害性，包括我国在内的许多国家都将它们列为水产养殖中的禁用药物。本产品适用于水产品中孔雀A石绿、结晶紫、隐性孔雀石绿和隐性结晶紫的快速检测。

【检 测 原 理】

水产品中的孔雀石绿、结晶紫及其代谢产物隐性孔雀石绿、隐性结晶紫经过处理后，提取液经过小柱富集形成有色环带，可初步判断样品中是否含有孔雀石绿、结晶紫。用洗脱剂将柱上待检物洗脱下来，经柱衍生化后，加萃取剂，若萃取剂有明显的绿色或紫色说明样品中含有待检物。将萃取剂取出滴于白色点滴板上，可在板上形成绿色或紫色斑点，从而可准确定性样品中是否含有孔雀石绿或结晶紫。

【检 测 步 骤】

1. 样品提取：取水产品可食部分（可用绞肉机绞碎或用剪刀剪取）5克于样品提取瓶中，加入10mL提取剂，研磨3分钟（可用10mL或5mL塑料离心管进行研磨），用滤纸过滤，收集5mL滤液，再向滤液中加入10mL蒸馏水（或纯净水），混匀备用，此为样品提取液。

2．小柱活化：取1支孔雀石绿小柱，向其中加入0.8mL洗脱剂，过柱（可用洗耳球加压），再加入1.5mL蒸馏水，过柱（可用洗耳球加压），弃去流出液，柱子不要挤干。

3．样品液过柱：将样品提取液加入柱子中，每次加约1.5mL，方便用洗耳球挤压，挤压力度适中使溶液逐滴流出，至样品提取液全部过柱，挤干，流出液弃去。然后用3mL蒸馏水分两次加入小柱中，洗涤柱子，洗耳球加压挤干，流出液舍弃。观察小柱中吸附剂颜色变化，若吸附剂逐渐形成绿色环带，可初步判断样品中含有孔雀石绿；若吸附剂逐渐形成紫色环带，可初步判断样品中含有结晶紫。

4. 洗脱：用3mL洗脱剂分两次加入小柱中进行洗脱，用5mL塑料离心管收集流出液，用洗耳球加压，观察流出液液体颜色判断。

5. 样品衍生化：向小柱中加0.5mL洗脱剂，过柱（用洗耳球加压），再加入1.5mL蒸馏水，过柱（用洗耳球加压），弃去流出液，洗耳球加压挤干。向小柱中加入耳勺1平勺衍生化试剂，加入1.5mL蒸馏水（或纯净水）并用洗耳球从上口加压挤干，弃去流出液。将步骤（4）中收集的流出液分两次加入柱中，用洗耳球加压，用另一个5mL离心管接收流出液，流出液流尽前（保持柱体润湿）再加1mL洗脱剂于小柱中，洗耳球加压挤干，继续用此离心管收集流出液。观察洗脱液过柱，小柱中吸附剂颜色变化，若步骤（3）吸附剂无颜色变化，而此时小柱吸附剂变绿，可初步判断样品中含有隐性孔雀石绿。

6. 萃取： 向步骤（5）中收集流出液中的离心管中加入0.8mL萃取剂，扣上管塞，按紧管塞上下颠倒10次（不要剧烈振荡），静置，若离心管下层溶液有明显的绿色或紫色则可判断样品中含有孔雀石绿或结晶紫，若无明显的绿色或紫色需进一步的判断。

7. 检测：用塑料吸管吸取步骤（6）中离心管中下层的萃取液（注意不要吸到上层液体），立即加入到白色点滴板的一个孔上，样液逐渐挥干，若在点滴板上形成绿色斑点说明样品中含有孔雀石绿，形成紫色斑点说明样品中含有结晶紫。

【检  出   限】

2.0 μg/kg（2.0ppb）。

【注 意 事 项】

1. 孔雀石绿提取剂、萃取剂取完后要立即旋紧瓶盖，密封好，以防挥发。

2. 试剂沾到皮肤上时要立即用清水冲洗

【储藏条件与有效期】 试剂常温避光保存，有效期为1年。