尿液中安非他明和甲安非他明固相萃取净化方法
时间:2010-05-25 阅读:2903
尿液中安非他明和甲安非他明固相萃取净化方法
1. 样品预处理
1mL尿液中加入 500μL0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.0),充分混合;
2. SPE净化
注意:所有过程流速均维持2~3mL/min。
a. 活化:SPEC柱中加入200μL甲醇,静置1min;
b. 上样:将预处理过的样品载入SPE柱,并打开真空阀抽吸;
c. 淋洗:用500μL 0.1mol/L的醋酸淋洗SPEC柱,增大真空度,维持1min,抽干;再用500μL甲醇淋洗SPEC柱,增大真空度,维持1min,抽干;
d. 洗脱:用800μL洗脱溶剂(80mL乙酸乙酯,20mL甲醇,2mL氨水充分混合)洗脱,控制较温和的真空度,使洗脱溶剂缓慢流经SPEC萃取盘,收集全部洗脱液;
3. 衍生化
a. 洗脱液中加入50μL 1%的酸性甲醇,充分振摇;
b. 35℃氮吹干燥(要缓慢干燥);
c. 加入50μL七氟丁酸酐(HFBA),密封后充分混合,70℃加热2min,冷却至室温;
d. 加入700μL乙酸乙酯,密封振摇。
4. GC-MS检测
5. 样品成分
安非他明
甲安非他明
方法中使用的SPE柱:
SPEC DAU( 3mL, PN. A532 DAU)。
1. 样品预处理
1mL尿液中加入 500μL0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.0),充分混合;
2. SPE净化
注意:所有过程流速均维持2~3mL/min。
a. 活化:SPEC柱中加入200μL甲醇,静置1min;
b. 上样:将预处理过的样品载入SPE柱,并打开真空阀抽吸;
c. 淋洗:用500μL 0.1mol/L的醋酸淋洗SPEC柱,增大真空度,维持1min,抽干;再用500μL甲醇淋洗SPEC柱,增大真空度,维持1min,抽干;
d. 洗脱:用800μL洗脱溶剂(80mL乙酸乙酯,20mL甲醇,2mL氨水充分混合)洗脱,控制较温和的真空度,使洗脱溶剂缓慢流经SPEC萃取盘,收集全部洗脱液;
3. 衍生化
a. 洗脱液中加入50μL 1%的酸性甲醇,充分振摇;
b. 35℃氮吹干燥(要缓慢干燥);
c. 加入50μL七氟丁酸酐(HFBA),密封后充分混合,70℃加热2min,冷却至室温;
d. 加入700μL乙酸乙酯,密封振摇。
4. GC-MS检测
5. 样品成分
安非他明
甲安非他明
方法中使用的SPE柱:
SPEC DAU( 3mL, PN. A532 DAU)。