蛋白纯化 亲和层析柱1ml
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DS0101蛋白纯化 亲和层析柱1ml

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2024-07-28 21:04:57
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产品简介

蛋白纯化 亲和层析柱1ml
亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而设计的层析技术。 它是利用生物分子间存在很多特异性的相互作用 (如抗原和抗体、 酶和底物或抑制剂、激素和受体等) ,通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上, 利用分子间亲和力的特异性和可逆性, 对另一个分子进行分离纯化。

详细介绍

蛋白纯化 亲和层析柱1ml

产品说明
    亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而设计的层析技术。 它是利用生物分子间存在很多特异性的相互作用 (如抗原和抗体、 酶和底物或抑制剂、激素和受体等) ,通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上, 利用分子间亲和力的特异性和可逆性, 对另一个分子进行分离纯化。


索莱宝提供的亲和层析柱工具可应用于如下方面:
    ①纯化重组蛋白; ②纯化抗原和抗体; ③纯化多肽;④纯化 DNA;⑤糖蛋白的纯化;⑥纯化磷酸化蛋白和肽;⑦DNA 结合蛋白的纯化;⑧去除内毒素,等。


    亲和层析柱空柱管的材质为医疗级的聚丙烯, 这种工程材料通过大量的应用证明具有清洁无毒,不与生物分子结合和低溶解度的优点。
    亲和层析柱空柱所用的筛板是选用纯净的 UHWM-PE(超高分子量聚乙烯)为原料,经*的工艺加工而成,具有亲水性。筛板在装填时安置在填料基质的上下端,以阻挡昂贵的基质渗出。亲水性筛板采用了的亲水性 UHWM-PE 生产技术,该筛板能保证使用重力法时的流速为 1-2ml/分钟或 1-2 滴/秒。同时,该筛板和其它同类产品相比,不会由于亲水性基团的引入而对蛋白质产生吸附。另外,该亲水性筛板在使用过程中不易形成气泡,气泡会使流速降低,液体通过基质不均匀。


二 、 产品应用
1,抗体纯化
    纯化抗体一般用 Protein A 作为纯化的配体, 也可以用 Protein G 或 Protein L 或异源性抗体作为配体。
2,小分子物质提取(以提取黄曲霉毒素 M1 为例)
    试样通过免疫亲和柱时,黄曲霉毒素 M1 被提取。 亲和柱内含有的黄曲霉毒素 M1 特异性单克隆抗体交联在固体支持物上,当样品通过亲和柱时,抗体选择性的与黄曲霉毒素 M1(抗原)键合,形成抗体一抗原复合体。用水洗柱除去柱内杂质,然后用洗脱剂洗脱吸附在柱上的黄曲霉毒素 M1,收集洗脱液。用带有荧光检测器的高效液相色谱仪测定洗脱液中黄曲霉毒素M1 含量。
3,重组蛋白纯化
    近年来,随着生物技术,特别是基因工程技术的迅猛发展,重组蛋白表达和纯化越来越容易。 常用的重组蛋白表达策略是把蛋白与亲和标签融合表达, 利用亲和标签一步纯化出目标蛋白。 此方法无需了解蛋白质的生化特性或生理活性, 就可通过带标签的重组融合蛋白选择性地与层析基质上的配体结合, 从而得以纯化任何蛋白质。 此方法与常规的层析方法不同之处在于, 无需针对不同的蛋白质开发特定的配体和方法。 采用保护蛋白质结构和功能完整性的温和条件,可一步亲和层析从粗提物中纯化出重组蛋白,纯度可达 90%以上。亲和标签已成为后基因组学时代纯化重组蛋白常用手段。亲和标签系统一般具有以下特征:
(a)一步的吸附纯化;(b)对三级结构和生物活性影响小;(c)可方便且专一的去除以产生天然蛋质;(d)在纯化过程中重组蛋白的分析简便准确;(e)适用于大量的不同蛋白质。但是没有哪个标签是*的,只能根据实际需要去自己筛选,下表是分的标签以及纯化的方案。


 

三 、装柱步骤 :


1, 装下筛板
    把筛板浸泡于水中, 用超声或振荡赶掉筛板空隙中的空气,备用。用装柱工具把筛板顶入柱体,再用装柱工具把筛板平推到柱体底部。
2, 加装填料
    将填料和适量的缓冲液加入小烧杯中,制成混悬液。盖上柱体的下盖,用吸管取混悬液加入柱体中,当混悬液体积多于柱体体积时,取掉下盖放掉部分缓冲液,静置使填料沉到柱体底部。
3, 装上筛板
    保持柱体垂直,用装柱工具把筛板顶入柱体,再用装柱工具把筛板平推到填料上表面,盖上上盖。


注意 :某些应用需要在填料上表面和上筛板之间留适当空隙。

 

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运输说明:

1、极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
2、低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
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