DNA电泳试剂 DNAGREEN  核酸染料

货号 ：G7140

规格：0.5ml (10000×)

保存：常温运输，4℃保存，有效期一年。

注意 ：本产品属于微量核酸检测试剂，使用时请按照说明书操作。

产品简介 ：

目前常见的替代 EB 的核酸染料 SYBR Green I （属于花氰类染料） 虽然毒性比 EB 低、 灵敏度比 EB 高，但由于其化学稳定性差；此外，SYBR Green I 在电泳过程中能在 DNA 分子间移位，很容易使 DNA 条带模糊和扭曲，电泳清晰度和分辨率下降。所以在实际应用中依然不能有效替代 EB。本产品是同时具有 EB 稳定性和 SYBR Green I 低毒性的新性核酸染料，其特点如下：

1.  低毒。其主要成分未发现对人体有致癌性、未被列入有毒有害品，有利于保护使用者的健康和保护日益恶化的环境。

2.  灵敏。检测灵敏度跟 EB 相当，能满足常规核酸电泳实验要求。

3.  稳定。对光、水和热的稳定性跟 EB 相当，可加入琼脂糖凝胶中反复熔化。

4.  无分子间位移现象。不会出现 SYBR 染料常见的条带模糊和扭曲现象。

5.  使用方法多样。既可以加入熔化的胶中，也可以电泳后染色，还可用于 PAGE。

6.  跟各种常用的核酸电泳缓冲液（如 SuperBuffer-2、TBE、TAE）兼容，但在 SuperBuffer-2 和 TBE 中背景低。

7.  观察时不需要任何额外的仪器设备或 UV 光源，可以使用现成的观察 EB 的 300nm UV。

8.  可用于 RNA 染色(也呈绿色)。

9.  DNA 或 RNA 浓度较高时还可以直接在日光下观察 （需要将胶放在黑色背景下） 。 由于避免了 UV 对 DNA的伤害，尤其适用于胶回收实验。

使用方法:

电泳中染色：

本方法是将 DNAGREEN 直接加入溶化的凝胶中使用，只适用于琼脂糖凝胶电泳，不适用于 PAGE。

1.  将 DNAGREEN 直接加入到融化的琼脂糖凝胶中， 每 100mL 凝胶加 310 uL DNAGREEN， 混合均匀后倒胶。琼脂糖凝胶中不能含任何其他染料（如 EB 和 SYBR Green I，否则会相互干扰） 。在 100mL 琼脂糖凝胶中加入 DNAGREEN 的量不要超过 10 uL，否则背景增强。注意：一定要保证琼脂糖*熔化，尤其是在*次熔化胶的时候，否则未熔化的小颗粒将产生跟染料相同的荧光。

2.  将 DNA 样品与 DNA 上样液按比例混合后上样。注意：一定要使用不含 SDS 等去污剂的上样液，否则SDS 会跟染料结合，极大地降低灵敏度。

3.  上样后电泳，电泳参数同常规的电泳。

4.  电泳结束后在 300 nm 左右 的 UV 下观察。

注意：不要使用波长为 260 nm 或 360 nm 的 UV，否则检测灵敏度会降低。如果 DNA 或 RNA 浓度较高，还可以直接在日光下直接观察（需要将胶放在黑色背景下） ，

避免 UV 对 DNA 的伤害，尤其适用于胶回收实验。

5.  用配置了 520-550 nm 滤光片（一般呈黄色或深黄色）的相机拍照。注意：不要使用与 EB 兼容的红色滤光片（它能阻挡 520-550 nm 的光） 。如果能再加上能滤去 UV 的滤光片，效果会更好。

6.  后续 Southern、转膜或 DNA 胶回收实验按常规操作进行。

电泳后染色：

本方法是在电泳后对 DNA 进行染色，适用于琼脂糖凝胶电泳和 PAGE。但该方法需要单独的染色处理，染料用量较大，不推荐用于琼脂糖凝胶的染色。

1.  按照常规方法进行电泳。

2.  用去离子水将 DNAGREEN 稀释 500 倍后（100 mL 水需要加 0.2 mL DNAGREEN） ，将凝胶放入，室温下摇晃染色 30 分钟（对琼脂糖凝胶）或 15 分钟（对 PAGE） 。

3.  用水脱色 10-30 分钟，具体时间需根据背景强弱决定。

注意：电泳后染色液可以反复使用次数。

疑难解答: 

Q：本产品可否用于 RNA 染色？

A： 可以，不论 RNA 是在甲醛变性胶中电泳，还是在普通的 SuperBuffer-2、TBE 或 TAE 胶中电泳，RNA染色后在 300nm 下都跟 DNA 一样呈绿色，

Q：本产品是否可以加入上样液中进行染色？

A：不行，本产品只能直接加入凝胶中进行染色或电泳后再染色。

Q：为何前端（靠近正极）的 DNA 条带很淡或根本看不见？

A：跟 EB 一样，电泳时 DNAGREEN 朝负极方向移动，当前端的 DNA（小片段）进入没有 DNAGREEN的区域时，已经结合的染料分子会逐渐从 DNA 分子上脱落，所以条带会变淡或根本看不见。解决办法之一是缩短电泳时间或电泳后再染色；之二是在每 100 mL 电泳缓冲液中补加 3-5uL 染料。

Q：本产品在哪种缓冲液中效果好？

A：DNAGREEN 染料在不同缓冲液中背景荧光强度不同，从弱到强的顺序是：SuperBuffer-2、TBE、TAE。

在背景较强的缓冲液体中，可以适当降低染料的用量，比如 100mL 胶中加 3-5 uL。浓度需要稍做摸索。

Q：用 SYBR 染色的 DNA 在电泳时为何容易发生条带模糊和扭曲现象？

A：SYBR 染料一般与 DNA 的小沟结合，但在常规电泳条件下该结合并不牢固，染料分子可以在标记的和未

标记的 DNA 分子之间转移，使 DNA 分子的泳动速度时快（无染料结合时）时慢（有染料结合时） ，发生条带模糊和扭曲现象。嵌入型染料（如 EB 和本产品）与 DNA 结合牢固，则无此现象。

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DNA电泳试剂 DNAGREEN  核酸染料运输说明：
1、极低温产品：极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来，再用泡沫盒密封，胶带层层粘住泡沫盒，放入索莱宝的箱子，然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
2、低温产品：低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来，再使用泡沫盒密封，用胶带严实密封泡沫盒，再放入索莱宝的箱子（保温效果少可以持续一周），然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
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