组织芯片微阵列定制技术服务

实验技术简介:

  组织芯片(issue chip),也称组织微阵列(tissue microarrays),生物芯片技术的一个重要

分支，组织芯片技术是将几十至.上千个小组织切片集中于-张载片 上形成的缩微组织阵列，具有体积小、信息含量高、高效低耗和可比性强的优点。该技术问世十年以来以其大规模、高通量、 标准化等优点得到大范围的推广应用。组织芯片与基因芯片和蛋白质芯片一起构成了生物芯片系列，使人类第--次能够有效利用成百上千份组织标本,在基因组、转录组和蛋白质组三个水平上进行研究，被誉为医学、生物学领域的--次革命。组织芯片技术可以与其他很多常规技术如免疫组织化学(HC)、核酸原位杂交(ISH)、光原位杂交(FISH)等方法结合应用，它的应用领域正在不断地拓展。

实验操作流程:

制作组织芯片空心蜡模

利用组织芯片空心蜡模成型模具，--次成型制作组织芯片空心蜡模，具体操作如下:

1、将石蜡放入组织芯片制备系统熔蜡盘内加热熔化，熔蜡盘内放入一片适当大小的硬质光面塑料薄板。将空心蜡模成型框大口朝下平放于熔蜡盘中的塑料薄板上,调整熔蜡盘内石蜡的量，使熔化石蜡平面高出空心蜡模成型框约2 mm。

2、将无刃阵列管针管口朝下放置于组织芯片制备系统加热板上预热(70 °C)约10 min,平稳垂直插入上述空心蜡模成型框。

3、平稳移开熔蜡盘，室温冷却石蜡数分钟，熔蜡盘中石蜡呈半凝状态时，下压空心蜡模 成型框活动顶板，使其贴近蜡模成型框。

4、用小刀将空心蜡模成型框四周石蜡划离，继续室温冷却石蜡数分钟，熔蜡盘中不再有任何能流动的液体状石蜡。

5、将熔蜡盘放回组织芯片制备仪上加温数秒钟，熔蜡盘底部石蜡开始熔化时迅速整体移除阵列管针、蜡模成型框、蜡模成型框内的蜡模。

6、插入阵列管针针芯，推出并去除进入阵列管针内的石蜡，拔除阵列管针针芯，去除蜡模成型框外部残留的石蜡。

7、使用组织芯片空心蜡模拔模装置，均匀拔除阵列管针， 去除蜡模成型框活动顶板以及蜡模成型框周边残留的石蜡。组织芯片空心蜡模制备完毕。组织芯片空心蜡模无需从蜡模成型框中取出。

制作组织芯片石蜡块

1、目标组织定位:组织芯片供体蜡块常规病理切片1张，厚4μm,常规HE染色后进行组织病理诊断阅片，在组织切片的指引下，对相应供体蜡块进行目标组织定位标记。

2、组织芯片蜡芯取材与点样: 将蜡块放入适当温度的热水中预热软化片刻，应用组织芯片制备系统的芯月石蜡组织芯取样器钻取目标组织柱。目标组织柱逐-点样于组织芯片空心蜡模中的位置。用实心单针逐-将目标组织柱轻轻压平， 使其处于同-切片平面。将装满组织芯的蜡模平行移至一块薄铜板上,加热铜板数秒至贴近铜板的蜡模稍加熔化，迅速移除铜板，室温冷却数秒后去除铜板。

3、二次包埋组织芯片石蜡块:芯片组织面朝下,将点好样的组织芯片蜡块连同蜡模成型框放入盛有少量熔化石蜡的熔蜡盘中(熔化石蜡的深度约4 mm)，数秒种后即可肉眼观察到熔化的石蜡浸入到石蜡组织芯与蜡模孔的间隙。移除熔蜡盘,将塑料石蜡包埋盒放于蜡模成型框上,用勺舀取熔化的石蜡倒入包埋中，室温冷却数分钟，石蜡半凝状态时用小刀划离蜡模成型框周围的石蜡。石蜡*凝固后，复加热熔蜡盘移除二次包埋好的组织芯片石蜡块。

4、去除蜡模成型框以及塑料石蜡包埋盒周边残留石蜡，轮流加热蜡模成型框四周边框，使紧贴其边框内侧的石蜡熔化，取出成型的组织芯片石蜡块。根据不同的研究目的，将组织芯片石蜡切片铺于净洁的或经过其他特殊处理的载玻片上,继续应用于常规HE染色、免疫组织化学染色以及原位杂交等细胞学或分子生物学检测。

实验注意事项:

客户提供:

1、实验对象为组织样品，取适量(250~500mg) 新鲜组织样品或正确保存的组织样品，加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂，匀浆后抽提总蛋白。

2、实验对象为细胞样品，每份样品取1x106 ~ 1x107细胞，PBS清洗细胞，去PBS加0. 1ml~1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂抽提总蛋白。

3、实验对象为血清，则直接进入步骤3。

交付标准:

1、芯片检测数据

2、完整的实验操作规程、实验报告(含软件分析结果)以及实验材料

服务优势

1、拥有专业病理诊断医师进行阅片，对原有诊断进行确认，并统--诊断标准。

2、做到切片及供体蜡块双标记,确保组织采样的准确性。

3、采用高品质进口预制备受体蜡块，点阵排列整齐美观，并有多种规格可以选择;进口石蜡热稳定性佳，能确保组织芯与受体蜡块结合紧密。

4、拥有专业的病理技术员进行切片，每张切片不漏点跳点，终提供组织阵列完整的切片15套。

服务内容(价格咨询)

1、阅片服务:专业病理诊断医师进行阅片,并同步完成取样点标记，30元/例。

2、组织芯片蜡块制作

3、芯片蜡块切片

4、兔疫组化染色

5、兔疫组化染色结果判读

收费标准/服务周期/提供结果:

欢迎咨询详谈，我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。

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