一文为您介绍高纯硅胶色谱柱的柱效
时间:2021-05-12 阅读:1303
硅胶因其优良的机械强度和表面易改性等特征,已成为应用广泛的色谱柱填料。高纯硅胶色谱柱具有柱效高、选择性好及分析速度快等特点,因而被广泛用于分离极性小分子如药物,而用于糖、肽或蛋白质分离较少。
高纯硅胶色谱柱的直径为数毫米,其中填充有固体吸附剂或液体溶剂,所填充的吸附剂或溶剂称为固定相,与固定相相对应的还有一个流动相。流动相是一种与样品和固定相都不发生反应的气体,一般为氮或氦气。待分析的样品在色谱柱顶端注入流动相,流动相带着样品进入色谱柱,故流动相又称为载气。载气在分析过程中是连续地以一定流速流过色谱柱的,而样品则只是一次一次地注入,每注入一次得到一次分析结果。
柱效是高纯硅胶色谱柱对色谱中两种物质分离能力的大小,高效液相色谱法(HPLC)柱效测定的高低,不仅反映出填料性能,有时也反映出装填技术的好坏。所以,测定柱效无论对生产填料或预装柱的生产者,还是对使用填料或预装柱的色谱工作者来说,都是很重要的。通过柱效的测定,生产者可以比较准确地进行质量控制,色谱工作者可根据测定的柱效选择合适的色谱柱和监督色谱柱使用过程中是否被污染。
不同的色谱柱,固然有不同的柱效;但同一根色谱柱,测定柱效使用的方法不同,例如所用的化合物、流动相、流动相流速、温度、进样量、进样体积、半峰宽的测量等等不同,所得到的理论塔板数也不相同。当然,可以对所测定的柱效附上有关的实验条件,但是,若将柱效的测定方法趋于一致,测定条件大致相同,生产者和色谱工作者会更加方便。
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