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双抗体夹心ELISA主要用于检测大分子抗原。双夹心抗体ELISA为例介绍本法的操作程序。 
　　① 加抗体包被 → 4℃，洗涤三次、抛干 
　　② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干 
　　③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干 
　　④ 加底物液　→ 37℃ 15分钟，加终止液 
　　⑤ 用ELISA检测仪测定OD值

大鼠鸢尾素Elisa试剂盒价格,现货Irisin Elisa代测ELISA实验操作常见问题：
1．边缘效应 使用96孔板的ELISA测定中，常发现有“边缘效应"，即外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚***乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规ELISA测定中，将板从室温(通常在25℃左右)置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度(如37℃)，就可以很容易地排除“边缘效应"，并且可提高测定的重复性。 
2．加样在现在的ELISA商品试剂盒中，必然有使用微量加样器加入样本的步骤。注意的关键点是：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以，有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性，下次测定为阴性，往往就是上述加样及试剂大鼠鸢尾素Elisa试剂盒价格,现货Irisin Elisa代测注意事项： 
1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。 
2. 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。 
3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。 
4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液、或辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。 
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