仅供科研

NanoDrop 2000-Thermo NanoDrop 2000紫外分光光度

Thermo NanoDrop 2000紫外分光光度计是NanoDrop的产品，应用液体的表面张力特性，样品体积只需要0.5~2ul，在检测台上，经上下臂的接触拉出固定的光径达到快速、微量、高浓度、免石英管、免毛细管等耗材检测吸收值的优点。此产品设计受保护，并在全普遍广受欢迎，其准确度与便利性让科学家得以更有效率进行各项研究。

Thermo NanoDrop 2000紫外分光光度计使用高能量氙灯（pulsed xenon flash lamp）可提供190~840nm的全光谱检测，且不需要暖机，开机后立即使用。搭配高感度CCD array检测器，检测吸收值可高达300Abs（dsDNA浓度2~15000ng/ul），大部分纯化后的核酸几乎都不需要稀释即可检测。

       待测样品的均质性是NanoDrop 2000的较为高要求，一般核酸、蛋白质样品能在检测前以vortex mixer震匀为较为匀，若无vortex mixer也应以pipette吸放数次混匀。若担心genomic DNA可能因前述动作而断裂，则改以55?C加热约一分钟，使样品在侦测前呈现均匀状态，以确保 2ul 具有代表性。

      检测时选择不同检测模式，可以得到较为快速的结果：
● Nucleic Acid – 吸收光谱、230nm, 260nm, 280nm吸收值（换算成10mm光径吸收值）、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸浓度。

● UV-Vis – 190~840nm间所有波长的吸收值及光谱（以1mm光径吸收值呈现）。

● A280蛋白质定量法 – 280nm吸收值（换算成10mm光径吸收值）、260/280 ratio及蛋白质浓度。仅适用于纯化后的蛋白质，须具有已知的质量消光系数（mass extinction coefficient）方可计算。

● BCA、Bradford及Lowry – 依不同呈色剂提供不同波长吸收值结果，自动画出标准曲线并计算R square，待测蛋白质浓度。

* 蛋白质检测模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三种常见定量呈色剂，因呈色剂随时间会逐渐加深，使用前请详阅试剂说明书并制备不同浓度的标准品，在较为快时间内完成检测，以得到良好的标准曲线。每个标准曲线较为多可有七个标准品，每个标准品较为多可做五重复。

* 测蛋白质时样品体积需使用 2ul，每个样品检测后需以Kimwipes 低尘擦拭纸（编号： 34155 ）擦拭15~20回，以避免呈色剂与蛋白质的残留。

浓度范围：

NanoDrop　ND-2000C

产品描述：

NanoDrop　ND-2000C为NanoDrop　ND-2000的升级版本，ND-2000C具有ND-2000全部功能，除此之外，它还有以下突出特点：

1、检测耗时更短，仅需3秒钟；

2、具比色杯或者检测孔两种选择，适合检测各种类型的样本，包括易挥发性物质的检测；

3、检测范围更加宽泛，检测下限可低至0.4 ng/μl （dsDNA）；

4、内置比色杯，可进行实时动力学曲线研究，或者OD600细胞浓度的测量。

ND-2000C技术参数：

检测孔测量时:

   1、波长范围: 190-840nm；

   2、波长精度: 1nm；

3、分辨率: <1.8 nm （FWHM at Hg 253.7 nm）；

   4、其它: 1mm光程长度（可自动调整到0.05mm）；

   5、检测下限：2ng/μl（dsDNA）；

   6、检测上限：15000ng/μl（dsDNA）；

   7、吸光率度：0.002 absorbance （1mm光程）；

   8、吸光率准确性：2%（at 0.76 at 257 nm）；

   9、吸光率范围：0.02-300 （相当于10mm光程）；

   10、核酸检测周期：< 5s；

   11、体积：14cm×20cm。

比色杯测量时：

1、光柱高度：8.5 mm；

2、控温，37 ± 0.5 °C；

3、搅拌速度: 150 – 850 rpm;

4、四种光径可供选择，分别为1，2，5，10mm；

5、吸光率范围：0.002 – 1.5；

6、检测下限：0.4 ng/μl （dsDNA）；

7、检测上限：750 ng/μl （dsDNA）；

8、检测时间：< 3 s；

9、重量：2.1 kg.

二、使用方法舉例

dsDNA：
在主畫面點選Nucleic Acid，電腦與儀器自動完成連線。依照DNA所溶於之液體準備該溶液（務必確認DNA溶於二次水、TE buffer或哪一組kit的elution buffer）取出1.5 ul 點在偵測台上，放下上臂後再按Blank。在右上方拉選Sample Type 選 DNA-50，在Sample ID位置輸入樣品名稱，將樣品混勻，取出1.5 ul 點在偵測台上，放下上臂後再按Measure。點此觀看操作影片。

結果：
DNA濃度即以 9.691 x 50 = 484.5 算出。 260/280介於1.8~2.0通常代表此為較純的DNA（隨DNA組成不同會有差異）。 260/230高於260/280，介於1.8~2.2通常表示純化過程殘留污染物較少。若欲察看220~340nm間其他波長的吸收值，可使用滑鼠拉動位於230nm的直線，或在右邊λ處輸入其他波長數值。

三、結果整理：
NanoDrop2000 軟體在偵測一開始會詢問檔案欲存至何處，若未，則檔案會存在上一個使用者的檔案內。點此觀看或下載 Data 功能使用說明。

四、注意事項：
1. 偵測後立即使用拭鏡紙（Kimwipe類）擦拭台面。先取一張將上下台面的液體吸走，再將此laboratory wipe吸過樣品的面反折到內部，折疊四次後以單方向多次擦拭台面（DNA 擦 5次，Protein 擦 20次）。

2. 同一滴液體只能做一次偵測，欲重複定量同一樣品，請擦掉前一滴，重新取出一滴進行偵測。

3. 基本上核酸樣品可使用1~2ul做測量，隨各液體體積特性之不同會有不同體積需求，原則上不*過 2ul。並請使用2ul pipette避免體積不足導致液柱無法完整形成。唯蛋白質樣品因呈色劑與蛋白質本身特性，務必使用2ul進行偵測。

4. 當軟體跳出錯誤訊息時，請詳細閱讀並依指示進行障礙排除。常發生的情形是在偵測過程液柱並未正確形成，軟體會出現以下訊息。可先用肉眼觀察液柱是否未完整連接上下台面，或樣品內有泡泡，將上臂拉起後，擦掉該滴樣品，再重新進行偵測，必要時可將樣品體積加大至2ul。



正確的液柱應為：



5. 不可使用含有Hydrofluoric Acid (HF)之樣品，其他無腐蝕性之液體皆可使用。



五、日常與定期維護：

1.平時保持台面及儀器本身清潔。

2.定期校正。


常見問題：
問 1. 使用多少液體做測量？
答 1. 2ul，基本上可使用 0.5~2ul 做測量，隨各液體體積特性之不同會有不同體積需求，原則上不*過 2ul。並請使用2ul pipette 避免體積不足導致液柱無法完整形成。

問 2. 如何清潔台座？
答2. 使用 laboratory wipe 將上下座的液體吸走，再將此 laboratory wipe 吸過樣品的面反折到內部，折疊四次後以單方向多次擦拭台面（DNA 擦 5次，Protein 擦 20次）。點此觀看清潔台座影片。


問3. 儀器多久需要校正？
答3. 每台儀器出廠前皆經過多次測試，並附上測試報告。新機一年校正一次，之後建議每半年再進行一次校正。本公司備有一年兩次的校正合約，以原廠標準程序進行定期校正。若有特殊狀況亦可個案處理。

問4. 燈源多久需要更換？
答4.一般而言儀器內一個氙氣燈可偵測 350萬個樣品，依供電及實驗室環境會有些微差異。若儀器在初始化時反覆出現錯誤訊息，請進入Diagnostics內進行燈源強度確認，若看不見任何光譜，即為燈源壽終之訊息。

限制的免责声明：本仪器仅限科研使用。 非IVD医疗用途。我司销售皆为科研仪器，所售一切商品为非医疗器械。