实验线虫分离器

一、产品介绍

本款实验线虫分离器由玻璃漏斗、橡皮管、止水夹组成，适用于各植保站、森防站、兽医站、卫生防疫站以及高等院校和科研院所与线虫研究有关的科室。

二、c

三、使用方法

1、贝尔曼漏斗法：

将玻璃漏斗（直径为10–15 cm）置漏斗架上,下面接一段（10 cm左右）橡皮管,橡皮管上装一个止水夹。取湿重10g劈成“火柴杆”状大小的分离材料,用两层纱布包好,放入漏斗中,然后放入清水,清水以浸没分离材料为度。经过4–24小时,由于趋水性和本身的重量,线虫离开植物组织,并在水中游动,最后沉降到漏斗底部的橡皮管中。打开止水夹,取底部约5–15ml的水样,其中含有样本中大部分活动的线虫。在解剖镜下检查,如果线虫的数量少,可以离心（1500 r/min,2–3 min）沉降后再检查。

2、常规镜检：

分别将各标号盛有线虫分离液的培养皿置于解剖镜下观察,先确认有无线虫。对有线虫的样品进行活体镜检,观察它的一般形态结构。然后选择几条成熟、特征易观察的线虫,用针或吸管移至载玻片上的水滴中。将此载玻片在酒精灯火焰上方往返几次（5–6 s）或放置于已盛满高温热水、打开盖子的保温瓶口上,蒸30–60 s至虫体死亡,加盖玻片后在显微镜下观察。根据形态特征予以初步鉴别,以确定是否需作进一步的鉴定。

3、快速镜检：

（1）用显微镜直接观察线虫浓缩分离液。分离液经一定时间后,当漏斗下端和乳胶管内出现透明度降低甚至混浊现象、表明线虫的游离量较多时,即可用培养皿接取混浊状分离液3–5滴,直接置于解剖镜下观察；如有线虫,就将盛有分离液滴的培养皿,放置于已盛满高温热水、打开盖子的保温瓶口上,进行30–60 s的热杀处理,擦干培养皿底部凝结的小水珠,直接放置于显微镜下（先用低倍物镜,找到目标线虫,再转换到高倍物镜）观察形态特征予以鉴别。

（2）用显微镜直接观察线虫分离液。用培养皿盛放贝尔曼漏斗放出的线虫悬液适量,直接移放在光学显微镜下观察,用低倍镜调整焦距,找到线虫,一手移动培养皿,不断变换所观察线虫的位置,一手不断调整焦距。在10倍的接物镜下松材线虫的基本形态鉴定特征如头部、中食道球、阴门、交合刺、尾形等都可以清晰地观察到。发现分离液中存有松材线虫时,挑取线虫并制成临时玻片标本进一步观察。

四、形态鉴定：

依据雌雄成虫的形态,主要是雌成虫的形态进行鉴定。但分离到的线虫没有成虫或极少时,需进行培养,以获得大量雌雄成虫供鉴定。