LONZA荧光内毒素检测系统

（重组C因子法）

配置清单：荧光读数仪、电脑及软件、重组C因子试剂盒

重组C因子内毒素检测历程：

2012年6月，FDA将重组C因子法纳入可替代方法；

2015年7月，欧洲药典将重组C因子法纳入可替代方法；

2018年9月，FDA批准了首以重组C因子检测内毒素的单抗药；

2018年12月，欧洲药典征求意见稿将重组C因子纳入欧洲药典；

2019年1月，中国药典征求意见稿将重组C因子纳入2020版中国药典；

2019年12月，欧洲药典将重组C因子纳入到新一版的欧洲药典中，预计2021年生效。

什么是细菌内毒素？

1、是革兰氏阴性菌的细胞壁的产物。细菌在生活状态时不释放出来，只有当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时，才表现其毒性，内毒素的主要化学成分是脂多糖中的类脂A成分。

2、经消化道进入无危害，大量进入血液就会引起发热反应-“热原反应”，会激活多种炎症信号通路。因此对于所有的注射用品，植入式医疗器械均需要进行内毒素检测。

3、理化性质：内毒素不是蛋白质，因此非常耐热。只有在160℃的温度下加热2到4个小时，或用强碱、强酸或强氧化剂加温煮沸30分钟才能破坏它的生物活性。

4、生物制品(细胞制剂，药品，疫苗)无法通过这些方法去除热源 → 必须在整个生产过程中保证所有物料内毒素的含量，以满足终产品的内毒素含量符合放行标准 → 内毒素检测

荧光内毒素检测系统

Lonza内毒素检测

※ Lonza内毒素检测始于1976年，44年为客户提供可靠的内毒素产品和服务

※ 上市动态检测法

※ 上市重组C因子

※ Lonza提供专业的内毒素解决方案，服务对象覆盖70%的制药*企业，市场上大量的药物是通过lonza内毒素产品放行上市的

※ 市场的技术：

ü  鲎试剂+无动物源的重组C因子试剂检测内毒素

ü  全自动高通量内毒素工作站PyroTec技术

ü  符合21CFR part 11和EU GMP 附录11的内毒素检测分析软件WinKQCL

Fluorescent Endpoint Test – PyroGene ™
重组C因子法

※ PyroGene™ Recombinant Factor C Assay 是无动物源性组分的 LAL 替代方法。已经被 FDA 接受。此方法使用重组的 C 因子来代替鲎试剂级联反应的一个组分。与内毒素结合后激活并切割一个合成底物，释放出荧光分子。反应在 96 孔板中进行。在实验开始和经一小时孵育后用荧光检测仪（380Ex/440Em）进行检测。

※ 灵敏度：0.005-5EU/ml

※ 优势：

ü   通过消除假阳性反应葡聚糖，达到更高的内毒素特异性

ü   批次变化更小

ü   不使用动物制品

ü   确保供应安全

ü   FDA 认可的 LAL 替代方案

※ 所需的其他材料：

ü   带孵育功能的荧光检测仪

ü   WinKQCL™软件- WinKQCL 5.3.3/6.0

ü   LAL 检测用水（大包装的试剂盒需要单独购买）

ü   无致热源检测管

ü   LAL 检测级别多孔板

软件-WinKQCL software

•       好的内毒素检测和分析数据管理平台-24年基于用户体验持续改进(1996年version 1.0本发布)

•       *符合21CFR Part 11数据完整性要求

•       全面的检测分析，数据管理，和报告需求的完整解决方案

•       支持企业在内为各个工厂提供管理和协作

•       对接第三方系统(MODA，LIMS，LIS)

•       兼容自动化工作站

目前提供两个版本软件 WinKQCL 5.3.3/6.0