Boxbio®Nitric Oxide Synthase (NOS) Activity Typed Assay Kit

一氧化氮合成酶分型（TNOS、iNOS、cNOS）活性检测试剂盒

一氧化氮合成酶是生物体内催化 L-jing氨酸合成一氧化氮的一种酶，广泛存在于血管平滑肌、巨噬细胞等细胞中，作为细胞信息分子，在神经系统、免疫系统和心血管系统中起着重要的调节作用。

根据其酶活性对钙离子的依赖性不同，分为结构型 NOS（cNOS）和损伤诱导型 NOS（iNOS）。一氧化氮合成酶能够催化 L-jing氨酸、分子氧和 NADPH，生成 NO 和 NADP+，NO 在水溶液中极易氧化生成 NO2-和 NO3-；在酸性条件下，NO2-与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物，进一步与萘基乙烯基二胺偶合，产物在 550 nm 处具有特征吸收峰，通过吸光值变化即可表征一氧化氮合成酶的活性。

一氧化氮合成酶分型活性检测试剂盒测定过程中所需要的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿（光径 10 mm）/96孔板、研钵/匀浆器、可调式移液器、台式离心机、恒温水浴/培养箱和蒸馏水。

粗酶液的制备（可根据预实验结果适当调整样本量及比例）

①组织：称取 0.2 g 组织，加入 980 μL 提取液 A 和 20 μL 提取液 B，冰浴匀浆，4℃ 12000 g 离心 10 min，取上清液即为粗酶液，置于冰上待测。

②细菌或细胞：离心收集 1000 万细菌或细胞至离心管内，加入 980 μL 提取液 A 和 20 μL 提取液B，冰浴超声破碎（功率 200 W，超声 3 s，间隔 7 s，总时间 5 min），4℃ 12000 g 离心 10 min，取上清液即为粗酶液，置于冰上待测。

③培养液等液体样本：直接检测或适当稀释后再进行检测，若浑浊应适当离心取上清测定。

一氧化氮合成酶分型活性检测试剂盒测定过程中注意事项

①一氧化氮合成酶易变性失活，建议使用新鲜样本进行检测，粗酶液制备后应当天完成检测；

②试剂二配制好后，建议根据使用量取用所需试剂二，剩余试剂应尽快置于-20℃保存；

③若∆A 测定大于 0.4，建议将粗酶液适当稀释后再进行测定；若∆A 测定小于 0.02，建议适当延长酶促反应时间（第一步 37℃反应时间）或增加样本量后再进行测定，计算时相应修改；

④为保证结果准确且避免试剂损失，测定前请仔细阅读说明书（以实际收到说明书内容为准），确认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定，过程中问题请您及时与工作人员联系。

购前须知:

A.根据待测指标确定试剂盒种类、规格及数量；

B.确认检测设备和条件是否匹配；

C.确认货期和收货时间是否满足要求；

★购买前任何问题请及时与Boxbio客服或销售专员进行联系

收货须知：

A.请确保电话畅通，用户可以根据快递单号跟踪快递情况并完成收货；

B.请您收货时仔细检验货物的货号、包装、数量、外观（有无破损，泄露，污染 等），若产品发货情况有问题请在15天之内与Boxbio联系；

C.请您收货后根据产品的标签储存温度分开保存，并按照说明书中所述条 件正确使用及处置相关废物;

D.对于产品质量问题，请您在收到产品之日起3个月内提出书面说明并附详 细的测试结果以供参考，对于产品质量在上述期限内未提出异议则视为您 认可产品合格；

E.BOXBIO试剂盒效期3-6个月，超出产品效期未开封使用可以免费为您调 换一次产品；

F.产品质量问题退换货产生的快递费用由我公司承担。

产品定制

Boxbio为您提供大包装产品订制服务：

关于价格: 销售人员会和您沟通，询问您所需要定制的试剂盒，并根据需要检测的样本量与您协商需要定制 的规格，然后为您报价。

关于包装: 生产及库房发货会根据您所定制的试剂盒规格匹配相应的包装。因为是定制产品，可能提供的包 装不是常规规格的定制包装，望知晓。

关于货期: 定制产品的货期会根据您所定制的试剂盒的种类及规格核算生产时间，并由销售人员与您沟通。

助研基金

Boxbio致力于“让科研变得简单”，为了鼓励和支持科研工作者的学术研究，特推出“助研基金”奖励计划！凡发表的SCI的文章中注明产品由北京盒子生工科技有限公司(Beijing Boxbio Science ＆ Technology Co.,Ltd.)提供，即可申请相应的助研基金！

根据期刊影响因子，奖励规则如下：

⑴ 期刊影响因子： 0＜IF＜5，助研基金额度为300元；

⑵ 期刊影响因子： 5≤IF＜10，助研基金额度为800元；

⑶ 期刊影响因子： 10≤IF＜15，助研基金额度为1500元；

⑷ 期刊影响因子： 15≤IF＜20，助研基金额度为2500元；

⑸ 期刊影响因子： 20≤IF，助研基金额度为3500元。

*非SCI类文章，可申请精美礼品一份并获得相应积分。

申请须知：

⑴ 文章中须明确注明相应产品来源于北京盒子生工科技有限公司或Beijing Boxbio Science ＆ Technology Co.,Ltd.；

⑵ 奖励对象仅为文章的第一作者，共同一作者只可申请一份奖励；

⑶ 同一篇文章只可申请一次助研基金；

⑷ 文献中引用的产品若为试用装，则不参与此活动；

⑸ 本次活动解释权归北京盒子生工科技有限公司所有。

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