根据凯氏定氮原理测定氮需要三个步骤，即消解、蒸馏、滴定。凯氏定氮亦可以完成自动蒸馏过程。当被测定样品消解后，上机完成下列化学反应：

　　蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。

　　1.有机物中的胺根在强热和CuSO4，浓H2SO4 作用下，硝化生成（NH4）2SO4

　　反应式为：

　　CuSO4 +2NH2—+H2S04+2H+=（NH4）2S04

　　2.在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出NH3 ，收集于H3BO3 溶液中

　　反应式为:

　　（NH4）2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO4

　　2NH3+4H3BO3=（NH4）2B4O7+5H2O

　　3.用已知浓度的H2SO4（或HCI）标准溶液滴定，根据HCI消耗的量计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因子，既得蛋白质的含量

　　反应式为：

　　（NH4）2B4O7+H2SO4+5H2O=（NH4）2SO4+4H3BO3

　　（NH4）2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3