1.       样品QC

2.       从总RNA中分离mRNA（原始文库将采用至少2 µg mRNA进行构建）

3.       以带有NotI酶切位点的oligo（dT）Linker Primer为反转录引物，再在双链cDNA的5’端加SalII adaptor

4.       NotI酶切、过柱去除小片段

5.       将合成的双链cDNA与载体进行连接，连接产物转化DH10B感受态细胞

6.       cDNA文库的QC：检测库容量（重组子克隆数目）；随机挑取30个克隆子进行PCR鉴定和双向测序分析，检测含插入片段的克隆子比例，检测平均插入片段大小

客户提供

        注明样品的种属，收集样品后，应将样品立即置于干冰保持低温运输。

我们提供

       含有文库的甘油菌和质量分析鉴定报告

质量保证

      文库含有至少4 x 10⁶个原始克隆

       样品平均插入片断保证大于1.0 kb

     有超过85%的载体含有插入片段