土壤*钾试剂盒说明书（微量法）
时间：2020-09-30 阅读：1790
土壤*钾试剂盒说明书
微量法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
*钾是土壤中可被植物吸收利用的组分，具有促进植物淀粉和糖分合成、增加油脂和蛋白质含量、增强作物抗逆性等重要作用。
测定原理
在弱碱性条件下，钾离子与四苯硼钠结合成白色四苯硼钾沉淀，在420nm处的浊度增加， 浊度在一定范围内与钾离子浓度成正比。
自备实验用品及仪器
天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、震荡仪。
试剂组成和配制
提取液：液体 105mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。试剂三：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。
样本处理
新鲜土样风干，按照土壤质量（g）：提取液体积(mL)为1：5的比例（建议称取约0.2g土样，加入1mL提取液），振荡提取 1h，10000g ，25℃离心 10min，取上清液待测。
测定操作表
| 空白管 | 测定管 |
样本（μL） |
| 40 |
试剂一（μL） | 40 | 40 |
25℃静置 5min | ||
试剂二（μL） | 40 | 40 |
充分混匀 | ||
试剂三（μL） | 40 | 40 |
提取液（μL） | 80 | 40 |
充分混匀，25℃静置10min，于微量石英比色皿/96孔板，测定420nm 处吸光值A，分别记为A 空白管和A测定管，△A=A测定管-A空白管 | ||
计算公式
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线：y=0.0408x+0.0675，R2=0.998
*钾含量（mg/kg）=（△A-0.0675）÷ 0.0408×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）
=122.55×（△A-0.0675）÷W
V 反总：反应总体积，1mL；V 样：反应体系中加入样本体积，0.2mL；V 样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g
b. 用 96 孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y=0.0204x+0.0675，R2=0.998
*钾含量（mg/kg）=（△A-0.0675）÷ 0.0204×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）
=245.1×（△A-0.0675）÷W
V 反总：反应总体积，1mL；V 样：反应体系中加入样本体积，0.2mL；V 样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g
注意事项
低检出限为1.65mg/kg。