规格：100 管/96 样

酸性土壤*磷试剂盒说明书

微量法

注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

*磷是土壤中可被植物吸收的磷组分，包括全部水溶性磷、部分吸附态磷及有机态磷， 土壤中*磷是限制植物生长主要因子之一。

测定原理

用双酸法提取酸溶性磷和吸附态磷，用钼锑抗比色法测定。

自备实验用品及仪器

天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、震荡仪。

试剂组成和配制

提取液：液体 105mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：粉剂×1 支，4℃避光保存。临用前加 0.2mL 蒸馏水溶解。试剂二：液体 0.4mL×1 支，4℃保存。

工作液：临用前将试剂一和试剂混合，加 19.4mL 蒸馏水混匀。

样本处理

新鲜土样风干，过20目筛，按照土壤质量（g）：提取液体积(mL)为1：5的比例（建议称取约0.2g土样，加入1mL提取液），振荡提取 1h，10000g ，25℃离心10min，取上清液待测。

测定操作表

注意：空白管只需测定一次。

计算公式

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下 标准曲线：y=0.2585x-0.3007，R2=0.9903

*磷含量（mg/kg）=（△A+0.3007）÷ 0.2585×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）

= 38.68×（△A+0.3007）÷W

V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样：反应体系中加入样本体积，0.02mL；V 样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g

b. 用 96 孔板测定的计算公式如下

标准曲线：y=0.1293x-0.3007，R2=0.9903

*磷含量（mg/kg）=（△A+0.3007）÷ 0.1293×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）

= 77.36×（△A+0.3007）÷W

V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样：反应体系中加入样本体积，0.02mL；V 样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g

注意事项

1. 配好的试剂 3 天内使用完。

2. 低检出限为 1.16mg/g。

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