品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
EA02A\00 2016-01版
猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体(IgG)诊断试剂盒(酶联免疫法)说明书
【产品名称】
通用名称:猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体(IgG)诊断试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:Diagnostic Kit For Antibodies To
Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(PRRSV Ab),ELISA
猪蓝耳病检测【规格】
96T×2/盒
【预期用途】
本试剂盒主要目的是测定猪血清中猪蓝耳病毒抗体,可用于评估感染猪的血清学诊断以及猪蓝耳病毒疫苗免疫状况分析。
猪蓝耳病检测【检验原理】
本试剂盒应用固相酶联免疫吸附试验(ELISA)原理,由包被有高纯度的猪蓝耳病毒抗原的微孔反应板、辣根过氧化物酶标记的抗猪IgG及其它试剂配套组成。其反应机理为包被抗原与样本中的PRRSV-Ab结合,再与酶标抗猪IgG抗体形成“包被抗原+PRRSV-Ab+酶标抗猪IgG抗体”复合物,加入显色剂,通过酶催化反应显色。显色深浅与PRRSV-Ab的量成正比,当样本反应显色后,经酶标仪检测所得结果超过设定的临界值时结果判为阳性,即表明免疫产生了抗体或有自然感染存在。
猪蓝耳病检测【主要组成成份】
1 | PRRSV抗原包被板 | 96T×2 | |
2 | 酶标记物 | 22ml | 黄色帽 |
3 | 样本稀释液 | 50ml | 透明帽 |
4 | PRRSV-IgG阴性对照血清 | 1.5ml | 绿色帽 |
5 | PRRSV-IgG阳性对照血清 | 1.5ml | 红色帽 |
6 | 显色剂 | 12ml×2 | 橙色帽 |
7 | 终止液 | 12ml | 蓝色帽 |
8 | 20X浓缩洗涤液 | 50ml | 白色帽 |
9 | 盖板膜 | 2张 |
|
10 | 说明书 | 1份 |
|
【自备器材】
1.酶标仪,双波长450/630nm滤光片
2.微量移液器(单道1-100ul、0.5-10ul、多道30-300ul)
3.水浴箱或恒温箱
4.微量振荡器
5.一次性枪头(10ul,200ul)
6.去离子水
【样本要求】
1.本试剂检测的样本为猪血清,样本应无菌采集,2℃~8℃贮存应不超过一周,长期应在-20℃以下保存。
2.避免使用严重溶血、有沉淀物、含悬浮纤维蛋白及污染长菌及含叠氮钠血清样本。
【实验准备】
1.试剂盒组分回温平衡:试剂盒组分在实验前,先取出置室温30min,可以获得jia结果。.
2.样本稀释:用试剂盒提供的样本稀释液将样本作40倍稀释,稀释的样本混合均匀能取得较好结果。
3.配制洗涤液:将试剂盒所提供浓缩洗涤液直接用去离子水稀释20倍(例:将50ml洗涤液加入950ml去离子水中)。若20倍浓缩洗涤液出现结晶,属正常现象,放置37℃至溶解后即可。
【检验方法】
1.加样:根据样本数量,取所需板条,检测时,设阴、阳性对照各2孔,分别加入不用稀释的阴、阳性对照血清100μl于相应孔中(可不设空白对照)。其余为样本孔,每孔加100μl用样本稀释液稀释好的样本(可做单孔也可双孔检验)。
2.温育:加样后,盖上盖板膜,置37℃温育30分钟。
3.洗板:甩去孔内液体,用洗涤液注满反应板孔,静置10s左右,直接甩出,洗涤3次,后一次洗涤后拍干板内液体。
4.加酶:每孔加酶标记物100μl。
5.温育:加好酶标记物后盖上盖板膜,置37℃温育30分钟。
6.洗板:同步骤3。
7.显色:每孔加显色剂100μl,振荡混匀,37℃避光反应10分钟。
8.终止:每孔加终止液50μl,振荡10秒,充分混匀,终止后即读数。
9.读数:以450nm/ 630nm双波长检测,读取各孔吸光度值(OD值)。
【结果判定】
在酶标仪上测各孔的OD值。检测结果有效的条件是阳性对照孔的平均OD值≥0.6,阴性对照孔的平均OD值必须<0.15;样品中抗体存在与否,或样本中抗体的相对水平的高低由S/P值决定,S/P值计算时按以下方式处理:
S/P=(样本OD450/630值-NCx(—))/(PCx(—)-NCx(—)),其中NCx(—)表示阴性对照孔平均OD450/630值,PCx(—)表示阳性对照孔平均OD450/630值;
当样本的S/P≥0. 2时判为阳性;样品S/P值<0.2时判为阴性;
若进行大量样本检测时,可使用试剂盒专业分析软件进行分析数据结果,该软件可登陆本公司网站下载。
【注意事项】
1.本试剂盒仅供研究使用。
2.不要使用过期的试剂盒组分,不要把不用批次的组分混合使用。
3.使用试剂盒之前,一定要仔细阅读说明书。
4.本试剂盒应按含有传染性材料对待,试验废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。
5.微孔板从冷藏环境中取出时应在室温中平衡至潮气干尽后方可拆开,未用完的微孔板须放回有干燥剂的铝箔袋并密封2℃-8℃保存。未用完的液体试剂应盖好瓶盖,与其它配套组份放入试剂盒中于2℃-8℃避光保存。
6.应用微量移液器加入样本及试剂,并经常校对其准确性。
7.加洗涤液时应做到满而不溢,防止孔口有游离酶不能洗净或各孔间的交叉污染。
8.终止液有腐蚀性,若溅到皮肤或衣物上应立即用大量清水冲洗干净。
【储存条件及有效期】
于2℃~8℃避光保存,防止冷冻,有效期12个月。
【生产日期及批号】
详见包装袋和外包装盒。