番红O固绿染色实验服务

番红0固绿染色服务介绍

番红0固绿染色(软骨)在涉及关节软骨及软骨下骨的形态学研究中，常需要联合使用多种染料以显示其组织学结构。中,起源于上世纪60年代的番红0 (safranin 0) -固绿(fast green)染色因可以直观反映关节软骨、软骨下骨和骨组织结构而备受青睐。软骨呈红色，成骨呈绿色。

番红0固绿染色实验意义

番红0固绿染色染色是针对软骨及植物进行染色的方法，此方法简易，节约时间、用具器皿及药品，染色清晰。

实验步骤:

1软骨染色步骤:

①骨组织固定、脱钙,制成石蜡切片。

②切片常规脱蜡至水。

③入新鲜配制的weigert染液染色。

④流水冲洗。

⑤酸性乙醇分化液分化。

⑥蒸馏水洗。

⑦在固绿染色液内浸染。

⑧蒸馏水洗。

⑨入番红0染液内浸染。

（10）蒸馏水洗。

（11）用乙酸溶液洗涤切片，以便去除残留的固绿，再用蒸馏水洗。

（12）分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。

（13）二甲苯透明，中性树脂封固。

（14）镜检。

2.植物染色步骤:

①标本的处理:固定，切成石蜡切片。

②粘片。

③脱蜡:二甲苯-50%二甲苯+50%乙醇- -100%乙醇- -95%乙醇- -85%乙醇- -70%乙醇- -50%乙醇- -30%乙醇- -水。

④入番红0染色液染色。

⑤酸性乙醇分化液分化15s。

⑥脱色: 35%乙醇- -50%乙醇- -70%乙醇- -80%乙醇。

⑦水洗1min。

⑧入固绿染色液内浸染，蒸馏水洗1min。

⑨无水乙醇脱水3-5min,无水乙醇脱水，50%二 甲苯+50%乙醇透明5min,二甲苯5min。

（10）树脂封固。

染色结果:

(1)软骨染色结果:

软骨基质深红色:软骨细胞核蓝色;细胞浆、肌肉、胶原纤维及骨组织呈灰绿色。

(2)植物染色结果:

木质化、木栓化的细胞壁染成红色;纤维素细胞壁染成绿色:导管染成红色，筛管染成绿色。

实验技巧:

(1)软骨染色:

固绿与胶原纤维结合,不宜褪色，番红o-固绿染色的分化很关键，分化过度容易导致切片不着色，分化不足易导致切片着色

过深。

(2)植物染色:

番红染色后，在50%乙醇中脱色需经实践,如果脱色不够绿色会不好染;脱色过度会导致红色过淡,甚至全部绿色。

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