一、“人基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒”详细参数

规格：96Ｔ

品牌：ＲＤ

保存条件：2-8℃低温保存

保质期：六个月

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【ELISA试剂盒】提供免费检测服务：使用我公司试剂盒,只收取试剂盒的费用,其他辅助试剂全部免费。我们将根据实验工作量和难易程度，双方协定实验周期，保质保量完成委托实验，并将实验结果和材料用特快专递免费寄送到您手中。

二、人基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒实验中zui可能出现问题       
一、所有孔未显色？
分析原因：      
1、微孔加入抗体后，洗板不*，微孔中存在游离的抗体。          
2、用错试剂。          
3、在操作中忘记加酶或抗体。     
 解决办法：            
1、检查洗板器械，比如洗板机管道是否堵塞、洗液是否用完。          
2、在加样前，要看清瓶签。          
3、严格按说明书操作步骤进行实验，确保每步都到位。          
二、所有孔显色偏低？
分析原因：    
1、微孔加入抗体后，洗板不*，微孔中存在游离的抗体。          
2、洗板不干净。          
3、抗体污染了酶结合物等其它试剂。          
4、温度没达到要求。          
5、每孔加入的试剂量低于说明书要求量。      
解决办法：     
1、手工加蒸馏水洗板时，要避免吸头接触微孔，常更换新的蒸馏水。    
2、洗板时要确保每孔都注满蒸馏水（约400ul），且至少洗板五次。      
3、严格按说明书要求操作，每次取样要更换吸头。      
4、控制孵育温度在25℃。       
5、加样器吸头安放牢固避免吸样不足，加样时务必将吸头内液体打尽。 

人基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒Elisa实验前的准备

1仔细阅读说明书
2确定试剂盒在有效期内
3按说明书确定所有试剂齐全(数量、体积)
4标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存)，尽量分装做备份。短期内无法实验者，注意低温保存
5准备好所有实验额外所需物品，如试管、吸头、移液器、离心机等
6根据检测标本数量确定所需试剂的量
7按说明书将所用试剂平衡至室温，配制所需试剂
DIY夹心法ELISA常见技术指南
8选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对；若选择两个单抗，必须识别不同表位的抗体；从同一家公司选择抗体对。
9ELISA实验中为了确定*信号和zui低背景应将捕获抗体(0.5-4μg/ml)和检测抗体(0.25-2μg/ml)在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时，应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。
10标准品的配制：对于每种细胞因子应仔细阅读说明书，注意每批的细节。在使用细胞因子前，瞬时离心试剂瓶，尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节，将冻干的细胞因子复溶。
11一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
12为了优化灵敏度，建议过一夜孵育标准品和标本。
13若使用过氧化物酶作为显色系统，应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠，叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。
14当测定混合液体中的抗原时，如血清，建议在标本稀释液中加不相干的Ig.

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