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程艳： :

水质大肠菌群检测纸片（五管法）

1 适用范围：适用于饮用水中总大肠菌群的快速检验。

2 方法原理：将乳糖、显色剂和选择性培养基加载在纸片上，经培养后能够在纸片上生长并发酵乳糖产酸的即为大肠菌群阳性，记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数，根据大肠菌群MPN表查出相应的大肠菌群数。

3 操作方法

3.1用灭菌吸管吸取10mL水样插入装有大纸片的塑料薄膜袋中，均匀涂布，共做5个重复；

3.2将接种好的纸片平放于培养箱中，36℃±1℃，培养15～24h观察结果。

3.3观察每片颜色变化，若纸片保持紫蓝色不变为大肠菌群阴性，纸片变黄或在黄色背景上呈现红色斑点或片状红晕为大肠菌群阳性。

3.4根据阳性反应纸片数，查MPN表得出水样中总大肠菌群的MPN值（见表2）。如所有纸片均为阴性时，可报告总大肠菌群未检出。

3.5 对于阳性纸片，应进一步检验大肠埃希氏菌或耐热大肠菌群。用无菌镊子在阳性菌斑处挑取少许带菌滤纸，用3mL无菌水混匀，接种到大肠埃希氏菌耐热大肠菌群测试片上，进行44.5℃培养和检验。

表2  用5份10mL水样时各种阳性和阴性结果组合时的zui可能数（MPN）