化学发光试剂操作的规范性
时间:2015-10-20 阅读:2559
1. 保存条件:
1.1 试剂盒应放置于2~8℃冰箱中存放。
1.2 试剂盒在取用过程中禁止颠倒,以避免试剂被污染。
1.3 有特殊要求的试剂应严格按照操作说明书要求的保存条件保存。
2. 保存时间:
2.1 未开封试剂盒于2~8℃保存时,可在有效期之内正常使用。
2.2 已开封试剂盒每次使用后需及时放回2~8℃冰箱内保存,应尽可能在开封后1个月内使用。(按说明指示的开封的半成品有效期计算,尽量在半成品zui短的有效期内用完)
化学发光试剂的准备
1、实验前,先将实验中所需的所有试剂及待测样品从冰箱中取出,待温度与室温(25℃)平衡1小时以上后使用。加样前应将所用试剂和待测样本分别充分混匀。
2、酶结合物和抗体混匀时,切忌产生大量气泡。
3、实验中用于冻干品复溶和稀释浓缩洗涤液所用的蒸馏水或去离子水应保证质量。
4、冻干品加入蒸馏水或去离子水后,应盖上胶塞后静置,待固体物质*溶解后,再将试剂瓶反扣在实验台上,让附着在瓶盖上的固体物质溶解,然后充分混匀后待用。
酶促化学发光测定的主要问题
1、 酶促化学发光一步法的“ HOOK EFFECT” 问题
2、 酶促化学发光测定出现假阳性的原因
2.1操作及仪器因素:加样、洗板、自动化加样系统的标本间“交叉污染”;
2.2标本因素: RF、补体、异嗜性抗体、动物抗原、动物抗体、高浓度Ig、溶血、细菌污染、标本贮存时间过长、标本凝固不全。
3、酶促化学发光测定出现假阳性的原因
3.1操作、试剂及仪器因素:标本未加、试剂过期或变质、仪器针孔堵塞、标本“交叉污染”;
3.2标本因素:补体、自身抗体、反复冻融
4、 综上所述,尽管化学发光免疫分析的操作步骤非常简单,但有可能会影响测定结果的因素却较多,分布在测定操作的各步之中,尤以加样、温育和洗板为甚。