RNA纯化试剂盒说明书

RNA Cleanup Kit

RNA纯化试剂盒

Cat. No.   K0589

保存：室温

组分说明

                                            Catalog no.             K0589

                                              Kit Size                 20

                                             Buffer RL               20 ml

                                    Buffer RW2（concentrate）          11 ml

                                        RNase-Free Water             10 ml

                                          Spin Column RS               20

                                     Collection Tube（1.5 ml）           20

                                     Collection Tube（2 ml）             20

产品简介

    本试剂盒使用*的离心吸附柱，在高盐条件下 RNA 与硅基质膜高效、专一地结合，适用于从酶促反应及其他多种方法提取的 RNA 溶液中进一步纯化和浓缩 RNA，并将 RNA 样品进行脱盐处理，有效回收得到高纯度的 RNA。该试剂盒最小可以将 RNA 样品浓缩至 30-50 µl，回收得到的 RNA 可直接用于微点阵分析和 Real-time PCR 等敏感实验。

注意事项

1.  预防RNase污染，应注意以下几方面：

1）使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。

2）玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟，用水*冲洗后高压灭菌。

3）配制溶液应使用无RNase的水。

4）操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。

2.  第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在 Buffer RW2 中加入无水乙醇。

3.  Buffer RL 如果产生沉淀，请加热使其溶解后放置。

4.  所有离心步骤均在室温下进行，且所有操作步骤动作要迅速。

自备试剂：无水乙醇（新开封或提取RNA专用）  

操作步骤

 1.  用 RNA-Free Water 调整样品至总体积至 100  μl，加入 350 μl Buffer RL，充分混匀。

 2.  加入 250  μl  无水乙醇，混匀。

 3.  将得到的溶液700  μl转移到吸附柱（Spin Column RS）中（吸附柱已装入收集管 2 ml Collection Tube  中），10,000rpm（~11,500 x g）离心20秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

 4.  向吸附柱中加入500  μl Buffer  RW2（用前检查已加入无水乙醇）, 10,000 rpm  离心20秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

 5.  重复步骤4。

 6.  将吸附柱放回收集管中，12,000 rpm离心1分钟。

 7.  将吸附柱装入新的RNase-Free 1.5ml收集管中，向吸附膜的中间部位加入30-50  μl RNase-Free Water，室温放置1分钟，12,000 rpm离心1分钟，得到的RNA溶液保存在-70℃，防止降解。

     注意：  RNase-Free Water最好在70℃预热，确保RNA洗脱充分；洗脱体积不应小于30 μl，体积过小影响回收率。

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