上海抚生与您分享ELISA试剂盒洗涤的方法以及注意事项
时间:2020-07-27 阅读:160
一、浸泡式
1..吸干或甩干孔内反应液;
2..用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);
3.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2 分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;
4.吸干孔内液体。吸干应*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;
5.重复操作c 和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时
间。微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与
蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏
水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,
使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温 20,其浓度
可在0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。
二、流水冲洗式
流水冲洗法初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,
使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗 2 分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2 分钟,吸干
即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为*,且也简便、快速。
已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让
水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。