大鼠ELISA试剂盒样品制备方法
时间:2020-08-03 阅读:247
一、细胞培养物上清液
1.将细胞培养上清移至离心管,4℃,1,500 rpm 离心 10 分钟。
2.立即进行上清液的分装并于 -80℃ 保存。避免反复冻融。
二、细胞提取物
1.将细胞培养板放置在冰上。
2.吸出培养基并用预冷 PBS 轻轻漂洗细胞一次。
3.弃去 PBS ,向 100 mm 培养板加入 0.5ml 提取缓冲液。
4.收集细胞,然后移至经过预冷的离心管中。
5.短暂涡旋后冰上孵育 15-30 分钟
6.4℃ 13,000 rpm 离心 10 分钟,沉淀不溶性内容物。
7.将上清(这里是指可溶性细胞提取物)分装至预冷的离心管中,并于 -80℃ 保存。尽可能减少反复冻融次数。
三、条件培养基
1.将细胞接种到含*(含血清)生长培养基的培养容器中,使细胞增殖达到预期的融合度。
2.弃去培养基,用预温 PBS 小心洗涤。重复洗涤步骤。
3.弃去 PBS 洗涤液并小心加入无血清培养基。
4.孵育 1-2 天。
5.将培养基移至离心管,4℃ 1,500 rpm 离心 10 分钟。
6.立即分装上清并于 -80℃ 保存。避免反复冻融。
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