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具体步骤：
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织，剔除包膜及坏死组织，无菌PBS清洗3-5次；切成约1mm3组织块；
2. 加入2mmol 的 EDTA，摇匀后放置冰上约 30-60min；
3. 离心，并加入胶原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期间，置于37°培养箱。每15min摇晃一次，消化时间根据肿瘤组织来定，约1-2h；
5. 待大部分组织块消化成透明状时，用 40μm 的细胞滤网过滤细胞，收集；
6. 用培养基重悬，置于培养箱培养。
一、细胞基本属性 | |
细胞名称 | 兔骨骼肌细胞 |
组织来源 | 骨骼肌组织 |
商品货号 | A01X2142 |
种属来源 | 兔 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
细胞简介 | 兔骨骼肌细胞分离自四肢肌肉组织；骨骼肌又称横纹肌，肌肉中的一种，约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞，肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌，横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官，有丰富的血管、淋巴分布，在躯体神经支配下收缩或舒张，进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带(Ⅰ带)及暗带(A带)。明带染色较浅，而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间，有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段，叫做一个肌节。骨骼肌细胞也称横纹肌细胞，细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方，细胞多呈梭行，具有一定的方向性。骨骼肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。 |
包被条件 | PLL(0.1mg/ml) |
培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
传代特性 | 可传2-3代 |
消化液 | 0.25%胰蛋bai酶 |
培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5% |
注意事项：
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通。
原代细胞培养：
原代细胞（Primary cells）：是指直接从机体取出的组织或细胞获得单个细胞并在体外进行培养的细胞。这里的组织主要指：组织器官、外周血及胚胎等。
原代细胞培养：由于原代细胞生长缓慢，繁殖一定的代数停止生长（一般10代以内）。所以一般认为：培养的原代的第1和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。
公司产品仅供科研研究实验
公司正在出售的产品：
抗人TNFRII小鼠杂交瘤细胞；2H1 | 蟑螂西姆惠尔氏菌Shimwellia blattae |
抗人IgA杂交瘤细胞；6E9 | 长柄链格孢Alternaria longipes (Ellis & Everh.) E.W. Mason |
抗人白蛋白杂交瘤细胞；7G1 | 长柄木霉Trichoderma longibrachiatum |
抗人IgG小鼠杂交瘤细胞；2C4 | 长柄炭角菌Xylaria longipes |
抗SARS病毒N蛋白小鼠杂交瘤细胞；S01 | 长梗木霉Trichoderma longibrachiatum |
抗SARS病毒N蛋白杂交瘤细胞；SO2 | 长喙壳Ceratocystis adiposa (E.J. Butler) C. Moreau |
抗SARS病毒N蛋白小鼠杂交瘤细胞；S03 | 长喙壳菌Ceratocystis sp. |
抗人IgM小鼠杂交瘤细胞；3C6 | 长双歧杆菌猪亚种Bifidobacterium longum subsp. sius |
抗赭曲霉毒素A杂交瘤细胞；Z01 | 长形赖氨酸芽胞杆菌Lysinibacillus macroides |
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抗黄曲霉毒素B1小鼠杂交瘤细胞；B01 | 长枝木霉Trichoderma longibrachiatum |
抗肝细胞生长因子(HGF)杂交瘤细胞；HGF1 | 爪哇虫草Cordyceps javanica |
抗肝细胞生长因子(HGF)杂交瘤细胞；HGF2 | 兔骨骼肌细胞爪哇根霉Rhizopus javanicus Takada |
抗CEA小鼠杂交瘤细胞；C2 | 沼泽红假单胞菌Rhodopseudomonas palustris |
抗抗人垂体泌乳素杂交瘤细胞；PRL2 | 沼泽考克氏菌Kocuria palustris |
