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上海市所在地
一、细胞基本属性：
细胞名称 | 兔股动脉内皮细胞 | 商品货号 | A01X2032 |
组织来源 | 股动脉 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
种属来源 | 兔 | 传代特性 | 根据细胞特性 |
生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 铺路石状细胞 |
包被条件：
培养基：原代内皮细胞培养体系
换液频率：每2-3天换液一次
传代比例：
消化液：0.25%胰蛋bai酶
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
细胞简介 |
股动脉是下肢动脉的主干，由髂外动脉延续而来。在腹股沟韧带中点的深面入股三角。在股三角内，股动脉先位于股静脉的外侧，逐渐从外侧跨到股静脉的前方，下行入收肌管，再穿收肌腱裂孔至腘窝，易名腘动脉。 股动脉在腹股沟中点处位置表浅，可摸到搏动，是临床上急救压迫止血和进行穿刺的部位。股动脉动脉内皮细胞组成了动脉内壁，并持续受到血流剪切应力的影响。内皮细胞在切应力的作用下，分泌不同的内皮因子并进而影响血管收缩和生长。 主动脉内皮细胞也调节细胞黏附分子的表达来控制和精确调节炎症反应和组织纤维化。体外培养的原代股动脉内皮细胞可有效地帮助研究者研究内皮功能失调的机理，动脉粥样化等疾病的发病机理以及发展新的治疗方法。 |
图
原代细胞实验步骤：
一、取7-10d雄性SD大鼠，颈椎脱臼处死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二、在超净工作台中，将大鼠断头置于玻璃培养皿中，打开颅腔后取出全脑,放在盛有预冷的PBS玻璃培养皿中，去除小脑和间脑。
三、将大脑半球在干滤纸上缓慢滚动以去除软脑膜和脑膜大血管，再放在新的盛有预冷的PBS玻璃培养皿中。
四、用细解剖镊去除大脑白质、残余大血管和软脑膜，保留大脑皮质。
五、大脑皮质放于DMEM中，剪碎成约1mm3大小，放入50ml的离心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型胶原酶，0 .025-0 .05％IV型胶原酶，200-400U DNaseI)，混匀后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室温1 000×g离心8min，去上清液。
七、沉淀中加入20％BSA重悬浮，充分混匀，1 000×g，20min，4℃离心，去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的胶原酶/分散酶，0.05-0.1％I型胶原酶，100-300U DNaseI )重悬浮，混匀，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室温离心6min，去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培养液悬浮混匀，铺于经离心形成连续梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃离心10min。
十、靠近底部的红细胞层之上的白黄色的层面即为纯化的微血管段，吸出后DMEM
漂洗两次(离心1000×rpm，6min，室温)，去上清液。
加入DMEM培养液(20％FBS，4ug/ml嘌呤霉素 )重悬浮，接种于含5％的大鼠 血清37℃孵育过夜所制备的细胞培养皿中，置于37℃、5％CO2培养箱内静置培养24h后更换不含嘌呤霉素的混合培养基，随后隔天换液。
原代细胞使用方法：
是一种贴壁细胞，细胞形态呈铺路石状细胞，在技术部标准操作流程下，细胞可传2-3代；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml培养基重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
公司正在出售的产品：
615小鼠滑膜肉瘤瘤株；ZM755
615小鼠乳腺癌瘤株；Ca763
615小鼠肺癌瘤株；HP615
615小鼠乳腺癌瘤株；Ca761
615小鼠T细胞性白血病瘤株；L7912
615小鼠乳头状肺腺癌瘤株；P615
小鼠肝癌瘤株；H22
615小鼠前胃癌瘤株；Fc
KM小鼠子宫颈癌瘤株；U14
KM小鼠子宫颈癌瘤株；U27
C57小鼠黑色素瘤瘤株；ME（Me）
Walker氏癌肉瘤256瘤株；W256
KM小鼠脑神经胶质母细胞瘤瘤株；G422
KM小鼠网织细胞肉瘤瘤株；LⅡ
T739小鼠肺腺癌瘤株；LA795
印度尼西亚醋酸杆菌Acetobacter indonesiensis
英诺克李斯特氏菌Listeria innocua
英诺克李斯特氏菌（无害李斯特氏菌）Listeria innocua
婴儿链球菌Streptococcus infantis
鹰嘴豆中间根瘤菌Mesorhizobium ciceri
荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescens Migula
荧光假单胞菌基因组DNAGenomic DNA from Pseudomonas fluorescens Migula
荧光假单胞菌生物型FPseudomonas fluorescens biotype F
瘿草黄青霉Penicillium minioluteum
应变型念珠菌Candida auris Satoh & Makimura
兔股动脉内皮细胞拥挤棒杆菌Corynebacterium accolens
蛹虫草Cordyceps millitaris
蛹虫草（北冬虫夏草、北虫草）Cordyceps millitaris (L. ex Fr.) Link
尤卡表球菌Epicoccum yuccae
油菜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary
