豚鼠白介素-6(IL-6)Elisa试剂盒

豚鼠白介素-6(IL-6)Elisa试剂盒

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2024-08-09 12:35:32
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上海慧颖生物科技有限公司

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产品简介

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详细介绍

产品名称:豚鼠白介素-6(IL-6)Elisa试剂盒
英文名称:Guinea pig interleukin6(IL-6) ELISA Kit
种鼠:豚鼠
规格:96T
品牌:Deco
价格:1200元
检测范围:5ng/L -150 ng/L 
有效期:6个月
保存温度:4℃
豚鼠白介素-6(IL-6)Elisa试剂盒,Guinea pig interleukin6(IL-6) ELISA Kit;是我公司主推产品之一,质量稳定,*,到货快,重复性好,售后齐全,可以免费代侧。仅用于科学研究,不得用于临床诊断。
实验原理:
  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中豚鼠白介素-6(IL-6)水平。用纯化的豚鼠白介素-6(IL-6)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入豚鼠白介素-6(IL-6),再与HRP标记的IL-6抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的白介素-6(IL-6)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中豚鼠白介素-6(IL-6)浓度。
操作步骤:
1.    标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为120ng/L,80ng/L ,40ng/L,20ng/L,10ng/L)。
2.    加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.    温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.    配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5.    洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.    加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.    温育:操作同3。
8.    洗涤:操作同5。
9.    显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 
10.    终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.    测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项:
1.    试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.    浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.    各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.    请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.    封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.    底物请避光保存。
7.    严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.    所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.    本试剂不同批号组分不得混用。

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