HaCaT细胞，人永生化表皮细胞形态

产品名称：HaCaT细胞

中文名称：人永生化表皮细胞

来源：人皮肤

类别：类属于正常细胞

细胞形态：上皮样

生长状态：贴壁生长

培养基：DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培养条件：37℃，5% CO2

消化条件：0.25% (w/v) Trypsin-0.03%(w/v) EDTA 溶液，消化 5-10min

主营细胞：DC2.4细胞，HOS细胞，3D4/21细胞，HCAEC细胞，Tca-8113细胞，NCI-H460细胞，MCF-7细胞，U251细胞

消化比例：1：4-1：10

换液时间：2-3 天换液一次

冻存液比例：85%培养基，10%FBS，5% (v/v) DMSO

冻存密度：1-3 ×10^6/管，液氮保存

主营细胞：CNE细胞，MADB-106细胞，Sf9细胞，HOC细胞，3T3-L1细胞，THP-1细胞。

若客户收到2ml小管HaCaT细胞，人永生化表皮细胞形态

收到细胞以后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超菌台内，严格无菌操作；然后将小管细胞转移至T25培养瓶，加入5ml左右含FBS的培养基混匀，放入培养箱隔夜培养后查看细胞汇合度：若未超过80%汇合度，换液继续培养，根据情况传代或者冻存。若超过80%汇合度，可直接进行传代（细胞贴壁处理方法）。

1、细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满*培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。从细胞资源中心获得细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作。

2、镜下观察：将瓶装的*培养液移入无菌瓶中，留待日后培养用，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培养液，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，按要求比例消化传代。（收到细胞，建议弃去原基培养，使用新鲜*培养基培养）

3、消化方法：

1、将瓶装的*培养液移入无菌瓶中，留待日后培养用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。（收到细胞，建议弃去原基培养，使用新鲜*培养基培养）

2、T25瓶加3ml PBS，洗一次，弃上清，再加1ml消化液消化，显微镜下观察，等细胞*脱离瓶壁分离成单个后，加培养基混匀，离心收集，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6， 1:6-1:8），每T25瓶加培养基至6-8ml，37℃、5%CO2孵箱培养。

慧颖生物购买HaCaT细胞，人永生化表皮细胞形态注意事项：

1、客户在收到细胞时，请首先观察培养瓶是否完好，培养液是否外渗，培养液是否混浊。如发现有瓶破、渗漏、培养液混浊等问题，请在收到细胞后立即与我们 王。

2、由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请离心收集，重悬细胞，置培养箱培养，细胞会重新贴附于瓶壁。如果细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力。

3、收到细胞时如无异常情况，请按照细胞处理方法处理细胞。